关键词:
狂犬病病毒
狂犬病病毒糖蛋白
抗体工程化
免疫球蛋白M
表位
抗体工程化
中和抗体
抗体亲和力
摘要:
[目的]将狂犬病病毒糖蛋白(RVGP)上3种针对不同类型表位的单克隆IgG抗体改造为IgM工程化抗体,对改造前后针对不同类型表位抗体的效力学差异进行探究。[方法]通过质粒构建将不同类型表位的单克隆IgG抗体进行IgM工程化改造并表达纯化。通过ELISA和RFFIT检测了改造前后抗体亲和力、中和活性以及二者变化的相关性,检测了不同病毒MOI下改造后的IgM抗体抑制病毒的效力变化。[结果]纯化出3种IgM工程化抗体,经鉴定,针对1号线性表位改造后IgM亲和力变大,EC50由0.598 5μg/mL降至0.064 8μg/mL,中和活性由32.43 IU/mg升至842.97 IU/mg,且在高浓度病毒下该抗体仍具备较好的中和活性。三种抗体改造后亲和力变化与中和活性变化具有相关性(P<0.05)。[结论]针对RVGP的1号线性表位IgM工程化改造能够提升抗体的生物学活性,亲和力、中和活性分别提升了9.24倍、25.99倍,且改造前后亲和力与中和活性变化呈线性相关。