关键词:
乳酸菌
分离
鉴定
生物学特性
安全性
摘要:
本试验旨在从健康断奶仔猪粪便中筛选出产酸性能较好和具有益生特性的乳酸菌,为其作为饲料添加剂的应用奠定基础。首先用含碳酸钙(CaCO_(3))的MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,然后通过菌株的产酸能力初步筛选出10株产酸能力较强的乳酸菌,对其进行分子生物学鉴定确定种属,并进一步评价其生长特性、耐受性、黏附能力、抗生素敏感性和抑菌能力,最后进行体内安全性评价。结果显示:筛选得到的产酸能力较强的10株乳酸菌(L2、L3、L4、L5、L7、L11、L13、L21、L22和L24)经16S rRNA测序鉴定均为唾液乳杆菌。在生长特性上,分离出的10株乳酸菌的生长情况相似,2~12 h为对数生长期;从耐受性上看,在pH为3.0的环境中培养3 h后,L4和L22表现出较高的耐酸性,存活率分别为36.24%和36.20%,在胆盐浓度为0.3%的胆盐环境中培养3 h后,L5的存活率最高,为41.14%;从黏附能力上看,分离出的10株乳酸菌的表面疏水率均在70%以上,其中L5最高,为87.76%,L7最低,为70.87%;L24表现出最强的自聚集能力,自聚集率为28.27%;抗生素药敏试验结果显示,分离出的10株乳酸菌对阿莫西林、呱拉西林、氟苯尼考、多西环素、头孢拉定、头孢呋辛和氧氟沙星均表现出敏感性,对苯唑西林和庆大霉素耐药;抑菌试验结果显示,分离出的10株乳酸菌均可以抑制目前常见的肠道病原菌的生长;选取L3和L5菌株进行小鼠体内安全性试验,结果显示灌胃乳酸菌(L3、L5和L3+L5)对小鼠体重和采食量均无负面影响,剖检后小鼠脏器无病理变化。综上所述,本试验从健康断奶仔猪粪便中筛选出的10株唾液乳杆菌具有较好的益生特性,尤其是唾液乳杆菌L3和L5,可作为饲料添加剂的候选菌株。