关键词:
肺癌
A549细胞
LRP1
增殖
迁移
侵袭
摘要:
目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)在肺癌细胞中的表达水平及其生物学意义。方法:常规培养人类肺癌A549细胞,RT-PCR法检测A549细胞中LRP1的mRNA水平。构建针对LRP1的siRNA感染细胞,利用绿色荧光标记载体,通过荧光显微镜观察感染效率,利用RT-PCR检测敲减效率,Western blot检测LRP1表达水平变化。选用A549/LRP1 siRNA细胞系进行功能实验,利用CCK-8实验检测细胞增殖能力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:从定量PCR结果可以看出,A549细胞中,相对于NC组,KD组LRP1基因敲减效率为77.7%,KD组细胞中LRP1的mRNA水平明显低于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot检测结果显示,KD组LRP1表达水平相对于NC组显著下调。CCK-8检测结果表明相对于NC组,KD组于Day 5的细胞增殖倍数显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,相比NC组,KD组细胞划痕8小时、24小时迁移率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,在侵袭小室内孵育24 h后KD组细胞侵袭转移率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LRP1对于肺癌A549细胞的生物学功能起着重要作用。下调LRP1能够抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力。对于LRP1分子上下游信号通路研究,在肺癌的诊断与治疗领域有一定的临床参考价值。