关键词:
群体感应
生物被膜
SdiA
抗逆性
泳动性
摘要:
群体感应系统能够使大肠杆菌(Escherichia coli)感知并适应环境的应激压力,对其生物被膜形成、抗逆性具有重要意义。SdiA是Ⅰ型群体感应系统的受体蛋白,能够识别信号分子并调控下游基因,提高大肠杆菌的抗胁迫能力。本文以大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)为研究对象,通过异源表达Ⅰ型群体感应系统受体蛋白SdiA,考察SdiA对细菌生物被膜形成、运动性和抗逆性等生物学特性的影响。结果表明,重组菌株*** BL21(DE3)pET28a sdiA的生物被膜产量较野生株显著降低了20.03%。同时,大肠杆菌中表达的受体蛋白SdiA能够对信号分子C4 HSL完成应答,并进一步抑制生物被膜形成。培养24 h后,SdiA表达菌株的运动半径相较于野生株降低了62.5%。在酸性环境中(pH=3),SdiA表达株的细菌存活率提升了9.27倍;在高渗透压环境中,SdiA表达株的细菌存活率较野生株提升了62.76%。荧光定量PCR结果显示,aphA基因在SdiA表达株中表达量上调了41.76%;lsrB基因的表达量降低30.47%;鞭毛和菌毛形成相关基因motB、csgD、fimA和fimC的表达水平分别下调了48.39%、39.57%、49.67%和23.21%。以上结果表明,SdiA蛋白通过调控群体感应以及运动性相关基因的转录,进而抑制大肠杆菌生物被膜形成和泳动性。同时,SdiA蛋白作为大肠杆菌中重要的转录因子,在其遭遇酸性条件和渗透压胁迫时具有正向调控作用。因此,本文揭示了SdiA蛋白对大肠杆菌工程菌株生物学特性的调控作用,为利用群体感应精准调控菌群行为提供了有效靶点。