关键词:
海氏肠球菌
分离鉴定
生物学特性
益生性
猎鹰
摘要:
【目的】自健康猎鹰粪便中分离具有益生作用的乳酸菌,为益生菌制剂的开发研究提供候选菌株。【方法】自阿合奇县采集6份猎鹰粪便样本,采用选择性培养基进行细菌分离培养,通过革兰染色、生化鉴定和16S rDNA PCR扩增和序列分析对分离菌进行鉴定,并对其进行生长曲线、产酸曲线、抗逆性、药物敏感性、体外抑菌、自聚集能力和表面疏水性等生物学特性测定和动物安全性试验。【结果】自猎鹰粪便中分离出3株分离菌,经革兰染色镜检为蓝紫色阳性球菌。分离菌生化鉴定结果显示,棉籽糖、葡萄糖和甲基红试验呈阳性,触酶试验、硫化氢试验、吲哚试验和V-P试验结果均为阴性,初步鉴定为肠球菌属。16S rDNA测序结果显示,分离株与NCBI登录的海氏肠球菌相似性均在99%以上,确定3株分离株均为海氏肠球菌,分别命名为EH1、EH2和EH3株。EH1、EH2和EH3株对数生长期分别为8~16、8~19和8~14 h,菌液产酸pH均稳定为4.5,具有较好的产酸性能。3株海氏肠球菌在pH为3.0和0.5%胆盐处理下均能存活,具有较好的抗逆性。3株海氏肠球菌无细胞上清液均对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较好抑菌效果,对链霉素和头孢噻呋呈中介,对环丙沙星、庆大霉素、红霉素、替米考星、青霉素、氨苄西林和氯霉素敏感。以EH1株的自凝集能力较高,为28.00%,以EH2株的疏水性较高,为52.10%;3株海氏肠球菌对昆明小鼠均无致病性。【结论】本研究分离获得3株猎鹰粪源海氏肠球菌,均具有良好的益生性,可作为益生菌制剂的候选菌株。