关键词:
外泌体
微小RNA
类风湿性关节炎
生物学标志物
摘要:
目的评估血清外泌体miR-148a-5p作为RA生物学标志物的可能,初步探究其参与RA发病的机制。方法共观察80人(HCs 30人,RA 50人),提取血清外泌体并鉴定;二代测序、qRT-PCR验证外泌体miR-148a-5p的表达,评估其临床意义。利用荧光素酶、细胞转染、ELISA实验,明确其靶基因及功能。结果二代测序实验共获得55个差异表达的外泌体miRNAs(44个上调,11个下调)。qRT-PCR实验显示,外泌体miR-148a-5p在RA患者血清中高表达(P<0.001),与RF、ESR、DAS28相关,ROC曲线提示其具备较好的诊断敏感性和特异性(AUC 0.8633,95%CI:0.7746~0.9519)。CREB5为miR-148a-5p调控的潜在靶基因。CCK-8实验显示,miR-148a-5p mimic在转染48 h、72 h明显促进MH7A和M0巨噬细胞增殖(P<0.001),miR-148a-5p inhibitor在转染后48 h抑制MH7A和M0巨噬细胞增殖(P<0.05),且72 h时的抑制效果更明显(P<0.001)。MiR-148a-5p mimic明显抑制MH7A内CREB5的蛋白表达,并促进MMP-3、CXCL10的分泌,miR-148a-5p inhibitor可以逆转此现象。但miR-148a-5p mimic和inhibitor对RBMXL1及M0巨噬细胞内CREB5蛋白表达无影响(P>0.05)。结论血清外泌体miR-148a-5p可作为RA新的生物学标志物,其通过对CREB5蛋白水平的影响,促进MH7A增殖及MMP-3、CXCL10的分泌,参与RA的发病进程。