关键词:
血型
ABO亚型
基因分型
基因测序
糖基转移酶B
摘要:
目的 分析正定型为O型、反定型Ac和Bc凝集强度相差≥2+患者的血清学及分子生物学特征,探讨其发生机制。方法 2023年1月—2024年11月河南省人民医院行血型血清学鉴定检出正定型为O型、反定型Ac和Bc凝集强度相差≥2+患者46例,其中反定型Ac凝集强度≥Bc凝集强度2+者30例为A组,反定型Bc凝集强度≥Ac凝集强度2+者16例为B组。采用PCR-SSP法检测ABO基因分型,对ABO基因第1~7外显子行Sanger测序;对1例Bw亚型患者c.905A>G(***302Gly)突变和1例Bel亚型患者c.586T>C(***196Arg)突变,应用SWISS-MODEL软件对突变型蛋白结构进行预测,应用PyMol软件对野生型和突变型蛋白结构进行分析。结果 46例正定型均为O型,A组30例反定型Ac凝集强度3~4+,Bc凝集强度±~2+;B组16例反定型Ac凝集强度±~2+,Bc凝集强度3~4+。46例微柱凝胶卡式法与试管法血型鉴定结果一致;A、B组吸收放散试验阳性各1例。46例患者检出A亚型或B亚型11例(23.9%),包括Ael型6例,Aw型2例,Bel型2例,Bw型1例。A组表型为Bel、Bw,基因型包括ABO*BEL.03/ABO*O.01.01、ABO*BW.27/ABO*O.01.02、ABO*BEL(未分类)/ABO*O.01.01;B组表型为Ael、Aw,基因型包括ABO*AEL.02/ABO*O.01.01、ABO*AEL.02/ABO*O.01.02、ABO*AEL(未分类)/ABO*O.01.01、ABO*AW31.02-05/ABO*O.01.01、ABO*AW.37/ABO*O.01.02。1例Bw亚型患者发生ABO*BW.27基因c.905A>G突变,该突变位于ABO基因第7外显子,导致糖基转移酶B上第302位天冬氨酸变为甘氨酸;该突变体靠近糖基转移酶B的催化活性中心,引起分子内氢键减少,仅保留与Leu243间的1条氢键。1例Bel亚型患者发生ABO*BEL(未分类)基因c.586T>C突变,该突变位于ABO基因第7外显子,导致糖基转移酶B上第196位半胱氨酸变为精氨酸;该突变体远离糖基转移酶B的催化活性中心,分子内氢键未发生明显变化,仍保留与Ser193、Ile192和Leu201间的氢键。结论 对于正定型为O型、反定型Ac和Bc凝集强度相差≥2+患者,分子生物学方法有助于准确判定血型;ABO*B基因c.905A>G和c.586T>C突变可能是B亚型形成的分子生物学基础。