关键词:
白花蛇舌草
HPLC指纹图谱
化学模式识别
相似度评价
质量评价
摘要:
目的 建立白花蛇舌草Hedyotis diffusa Willd HPLC指纹图谱,对不同产地、采收期、野生与栽培白花蛇舌草及混淆品进行对比分析。方法 采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min–1,波长为330 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结合相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)比较不同产地、采收期、野生与栽培白花蛇舌草及其混淆品的差异。结果 HPLC指纹图谱共标定了白花蛇舌草12个共有峰,结合超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS/MS)定性鉴别技术指认了绿原酸、水晶兰苷、白麻苷、槲皮素-3-O-桑布双糖苷、山柰酚-3-O-龙胆二糖、芦丁、皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-芥子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖基]-β-D-吡喃半乳糖苷、槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃半乳糖苷、(E)-6-O-对香豆酰鸡屎藤次苷甲酯、山柰酚-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰)-β-D-葡萄糖基]-β-D-半乳糖苷、(E)-6-O-阿魏酰鸡屎藤次苷甲酯、(E)-6-O-对香豆酰鸡屎藤次苷甲酯异构体。通过相似度分析发现,白花蛇舌草的不同产地和采收期、野生与栽培样品均存在一定的差异,与混淆品样品有明显差异;通过CA、PCA发现,30批白花蛇舌草样品存在产地交叉的现象,说明产地不是影响其质量的关键因素;通过CA、PCA、OPLS-DA可将40批样品根据不同采收期、野生与栽培、基原进行区分,通过OPLS-DA项下的投影中的变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)各筛选出6个差异性标志物。结论 建立的指纹图谱方法能准确有效区分白花蛇舌草不同采收期、野生与栽培及其混淆品,为白花蛇舌草的质量评价及鉴别提供参考。