血根碱抑制肺腺癌A549细胞生长及机制初探

作     者：李小娜 李开瑞 何迎春 徐朝军 宋岚 LI Xiaona;LI Kairui;HE Yingchun;XU Zhaojun;SONG Lan

作者机构：湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 中医药防治眼耳鼻喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南省中医药防治眼耳鼻喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院心胸外科湖南长沙410007 湖南中医药大学中医学国内一流建设学科湖南长沙410208 

出 版 物：《湖南中医药大学学报》 (Journal of Hunan University of Chinese Medicine)

年 卷 期：2021年第41卷第1期

页      面：61-66页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81874408) 中国博士后科学基金项目(2015M580690) 湖南省自然科学基金项目(2019JJ40216) 湖南省中医药科研计划项目(201696) 中医内科学省部共建教育部重点实验室开放基金项目(ZYNK201506) 湖南省干细胞中药调控实验室开放基金项目(2013GXB02) 湖南省研究生创新项目(CX2018B482) 湖南中医药大学研究生创新项目(2018CX62) 湖南省研究生科研创新项目(CX20190552) 

主　　题：血根碱 肺腺癌A549细胞 增殖 凋亡 细胞周期 

摘      要：目的研究血根碱(sanguinarine,SAN)对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将肺腺癌A549细胞随机分为空白组、SAN不同浓度(1.25、2.5、5、10μmol/L)组、阳性组。采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT]法和实时无标记动态细胞分析技术(real time cellular analysis,RTCA)检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测增殖相关蛋白(PCNA)、周期相关蛋白(Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4)、凋亡相关蛋白(Bax、XIAP、Survivin)表达水平。结果MTT法和RTCA检测结果均显示,不同浓度SAN均能够抑制肺腺癌A549细胞增殖(P0.01)。流式细胞术检测结果显示,不同浓度SAN(2.5、5μmol/L)处理肺腺癌A549细胞24 h后,其G1期比例显著增加(P0.01)。AnnexinV-FITC/PI双荧光染色法结果,经SAN(2.5、5μmol/L)处理24 h后的肺腺癌A549细胞凋亡率明显增加(P0.01)。Western blot结果显示,经SAN干预后的肺腺癌A549细胞的增殖相关蛋白PCNA(P0.01)、周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4(P0.01)、抗凋亡蛋白Survivin、XIAP(P0.05或P0.01)表达水平均显著降低,促凋亡蛋白Bax(P0.01)表达水平明显提高。结论SAN能抑制肺腺癌A549细胞增殖,将其细胞周期阻滞于G1期,并可诱导其细胞凋亡。