金黄色葡萄球菌蛋白A的原核表达及生物亲和特性研究

作     者：李志会 岳盈盈 李鹏 宋楠楠 沈琮 赵元昊 孟红 LI Zhi-hui;YUE Ying-ying;LI Peng;SONG Nan-nan;SHEN Cong;ZHAO Yuan-hao;MENG Hong

作者机构：山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 

出 版 物：《山东大学学报（医学版）》 (Journal of Shandong University:Health Sciences)

年 卷 期：2009年第47卷第10期

页      面：28-31页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：葡萄球菌蛋白A 原核表达 亲和性 

摘      要：目的构建金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)基因片段的表达载体,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,探讨该重组蛋白与不同来源IgG结合的生物学特性。方法利用PCR法扩增SPA基因片段,将该段基因克隆到pET30a(+)表达载体,转化感受态BL21大肠杆菌细胞,IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE及Westen-blot鉴定目的蛋白。His亲和层析纯化后分别与人、小鼠、兔、猪及山羊血清反应,分析其与不同来源IgG的亲和关系。结果构建的pET30a(+)-SPA表达载体在大肠杆菌BL21中可表达SPA蛋白,且发现其与人及小鼠源IgG具有较高亲和性,与兔及猪源IgG亲和性较低。结论该重组蛋白SPA与人及小鼠源免疫球蛋白IgG具有较高亲和性,为下一步应用于SPA-ELISA打下基础。