金银花-连翘提取物组合对CCl4诱导小鼠肝纤维化的改善作用研究

作     者：阎仕豪 苗蕙 黄镇林 季莉莉 YAN Shihao;MIAO Hui;HUANG Zhenlin;JI Lili

作者机构：上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 

出 版 物：《上海中医药大学学报》 (Academic Journal of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2021年第35卷第2期

页      面：50-56页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划“中医药现代化研究”重点专项项目(2018YFC1707302) 

主　　题：金银花-连翘 组合 肝纤维化 胶原沉积 肝星状细胞 小鼠 

摘      要：目的:探讨金银花-连翘提取物组合对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化的改善作用。方法:分别制备金银花和连翘提取物,混合后制得组合物(药材配比1∶2)。取雄性C57小鼠随机分为对照组、CCl4组、组合低剂量(0.5 g/kg)+CCl4组、组合高剂量(1.0 g/kg)+CCl4组、组合高剂量(1.0 g/kg)组,每组5只。除对照组和组合高剂量组外,其他各组小鼠腹腔注射CCl4诱导肝纤维化,每周2次,共4周。同时,各组灌胃给予相应剂量的组合物,连续4周。末次给药后,取血,收集肝脏组织。试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及肝脏羟脯氨酸(Hyp)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。HE染色观察肝组织形态学变化,天狼猩红染色和Masson染色观察肝脏胶原沉积。PCR检测肝组织胶原1a1(Col1a1)、胶原3a1(Col3a1)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β(TGF-β)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot检测肝组织α-SMA蛋白表达。结果:(1)与CCl4组相比,组合高剂量+CCl4组血清ALT、AST水平显著降低(P0.01),肝组织炎症反应和肝细胞坏死程度明显减轻。(2)与CCl4组相比,组合高剂量+CCl4组肝脏Hyp和ColⅣ含量显著降低(P0.05,P0.01),组合低剂量+CCl4组ColⅣ含量亦显著降低(P0.05),且两组肝组织胶原沉积程度明显减轻。(3)不同剂量的金银花-连翘组合物干预后,可明显下调模型小鼠肝脏Col1a1、Col3a1、FN和TGF-β的mRNA表达(P0.05,P0.01),α-SMA的mRNA和蛋白表达亦明显降低(P0.05,P0.01)。(4)金银花-连翘组合物对正常小鼠肝组织形态及以上指标无明显影响。结论:金银花-连翘提取物组合可能通过抑制肝星状细胞活化,减少胶原沉积,从而改善肝纤维化。