TNF-α刺激下牙周膜干细胞与CD3^(+)T细胞共培养对Wnt/β-catenin信号通路的影响

作     者：刘娜 李影 王燕一 张维 顾斌 LIU Na;LI Ying;WANG Yan-yi;ZHANG Wei;GU Bin

作者机构：中国人民解放军总医院海南医院口腔科三亚572013 中国人民解放军总医院第一医学中心口腔科北京100853 中国科学院理化技术研究所抗菌检测中心北京100040 

出 版 物：《中华老年口腔医学杂志》 (Chinese Journal of Geriatric Dentistry)

年 卷 期：2021年第19卷第2期

页      面：70-76页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(项目编号:31670998 81771102) 

主　　题：牙周膜干细胞 炎症 CD3^(+)T 经典Wnt通路 

摘      要：目的:探讨炎症条件下牙周膜干细胞与CD3^(+)T细胞共培养对经典Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:拔除健康前磨牙及第三磨牙,获取健康牙周膜干细胞(H-PDLSCs);人外源性TNF-α炎症因子10ng/mL刺激PDLSCs(I-PDLSCs)。免疫荧光染色检测H/I-PDLSCs Wnt通路蛋白β-catenin和LEF-1的表达。采用免疫磁珠法获取人的CD3^(+)T细胞。H/I-PDLSCs与CD3^(+)T细胞分别以1∶10,1∶20,1∶50,1∶100共培养,共培养48h,提取各组PDLSCs的RNA,反转录为c DNA后,qPCR检测β-catenin、LEF1、TCF4的基因表达;以上述比例共培养后收集各组细胞进行流式细胞仪细胞周期检测。结果:免疫荧光检测I-PDLSCs组β-catenin、LEF-1的表达强于H-PDLSCs组。共培养比例为1∶20和1∶50时,H-PDLSCs组β-catenin、LEF1的mRNA表达水平均降低;1∶20时TCF4 mRNA的表达水平增加,1∶50时降低。1∶20时,I-PDLSCs组β-catenin、LEF1的mRNA表达水平均增加,而在1∶50时基因的表达水平均降低。1∶20及1∶50时TCF4的表达水平均降低。H-PDLSCs与CD3^(+)T细胞共培养比例为1∶10时与H-PDLSCs对照组相比其增殖指数显著提高;1∶20、1∶50及1∶100时其PI指数显著降低。I-PDLSCs与CD3^(+)T细胞共培养比例为1∶10、1∶50及1∶100时与I-PDLSCs对照组相比其增殖指数显著降低(P0.05)。结论:炎症条件可激活牙周膜干细胞的Wnt/β-catenin信号通路,H/I-PDLSCs与CD3^(+)T细胞以1∶20、1∶50可稳定的下调Wnt/β-catenin经典信号通路,证实Wnt通路参与炎症条件下PDLSCs的免疫调节。