栀子苷对大鼠肝损伤及血清、肝脏、粪便中胆汁酸的影响

作     者：刘毓 张聪聪 胡永红 陈高峰 杨海琳 张定棋 陈佳美 刘平 刘伟 张华 LIU Yu;ZHANG Cong-cong;HU Yong-hong;CHEN Gao-feng;YANG Hai-lin;ZHANG Ding-qi;CHEN Jia-mei;LIU Ping;LIU Wei;ZHANG Hua

作者机构：上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学中药研究所交叉科学研究院上海201203 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2021年第27卷第11期

页      面：63-75页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100501[医学-中医基础理论] 100502[医学-中医临床基础] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81703681) 上海市科技创新行动计划项目(19401972700,20S21902600) 上海市青年科技英才扬帆计划项目(17YF1419800) 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室开放基金项目(TCM-202008) 

主　　题：栀子苷 肝脏毒性 肝组织 血清 粪便 胆汁酸 

摘      要：目的:探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性,以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法:60只SD大鼠,雌雄各半,按体质量随机分成空白组及栀子苷(50,100,200,400 mg·kg^(-1))组,共5组,每组12只,每天灌胃给药1次,连续7 d,于第8天收集大鼠血清、肝组织和盲肠内容物。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP)活性,白蛋白(ALB),总胆红素(TBIL),总胆汁酸(TBA),肌酐(Crea),尿素(Urea)含量,肝脏组织切片分别作苏木素-伊红(HE)染色,免疫组化检测细胞角蛋白7(CK7),细胞角蛋白19(CK19)蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肝组织CK7,CK19蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1),胆固醇27α-羟化酶(CYP27A1),胆固醇12α-羟化酶(CYP8B1)mRNA表达情况,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS)测定血清、肝脏及盲肠内容物中18种胆汁酸含量。结果:与空白组比较,各剂量栀子苷组TBIL水平显著升高(P0.01);400 mg·kg^(-1)栀子苷组ALT,AST活性和TBA含量明显升高(P0.05,P0.01);HE染色表明,与空白组比较,栀子苷200,400 mg·kg^(-1)组肝组织的汇管区有胆管反应,胆管周围有炎症细胞的浸润,尤以栀子苷400 mg·kg^(-1)毒性明显。栀子苷400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中CK7,CK19表达较空白组明显增加(P0.05,P0.01)。与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中甘氨熊脱氧胆酸(GUDCA),甘氨猪去氧胆酸(GHDCA)含量明显下降(P0.05,P0.01),牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA),猪去氧胆酸(HDCA),胆酸(CA),鹅去氧胆酸(CDCA)含量显著升高(P0.01),甘氨胆酸(GCA),甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA),甘氨脱氧胆酸(GDCA),甘氨石胆酸(GLCA),牛磺熊去氧胆酸(TUDCA),GUDCA,GHDCA,熊去氧胆酸(UDCA),牛磺石胆酸(TLCA)的含量占比降低,TCDCA,HDCA,CA,CDCA,脱氧胆酸(DCA)的占比增加;血清中GHDCA,石胆酸(LCA)含量显著下降(P0.01),牛磺猪去氧胆酸(THDCA),牛磺胆酸(TCA),GCA,TCDCA,UDCA,CA,CDCA,DCA含量明显增加(P0.05,P0.01),CA/DCA显著升高(P0.01),且CA与CDCA含量占比分别上升19.60%和4.63%;与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组盲肠内容物中所有的胆汁酸含量均下降,其中GCA,UDCA,HDCA,GCDCA,GDCA,TLCA,GLCA,CDCA,DCA,LCA含量明显下降(P0.05,P0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,400 mg·kg^(-1)栀子苷组肝组织中CYP7A1,CYP27A1mRNA表达明显增加(P0.05,P0.01)。结论:400 mg·kg^(-1)栀子苷灌胃,可导致大鼠明显的肝损伤,其肝脏、血清与粪便中胆汁酸发生显著改变,且同一种胆汁酸在肝脏、血清与粪便中的变化不尽相同。然而,由栀子苷所导致的肝损伤与体内胆汁酸变化间的因果关系尚不清楚,仍有待后续进一步研究给予阐明。