miR-34a-5p过表达靶向抑制MET对肝癌细胞HepG2恶性增殖、侵袭和肿瘤形成的影响

作     者：杨慧萍 朱梦佳 王淋 赵文霞 陈雨 Yang Huiping;Zhu Mengjia;Wang Lin

作者机构：河南中医药大学郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450000 郑州市妇幼保健院郑州450000 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2021年第56卷第5期

页      面：693-699页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：十三五国家科技重大专项(编号:2018ZX10303-502) 

主　　题：肝癌 miR-34a-5p 间质表皮转化因子 HepG2 

摘      要：目的探究miR-34a-5p过表达对肝癌细胞HepG2恶性增殖、侵袭和肿瘤形成的影响。方法荧光素酶实验检测miR-34a-5p与MET靶向关系。构建MET pcDNA载体过表达MET,将miR-34a-5p与pcDNA-MET单独或联合转染HepG2,将细胞随机分为4组:Control、mimic、MET和mimic+MET组进行后续实验。克隆形成法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell检测细胞侵袭、Western blot检测Ki67、PCNA、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平;构建肝癌裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为Control组和mimic组,检测裸鼠30 d肿瘤体积变化和第30天肿瘤重量,通过免疫组化方法检测Ki67阳性表达率、TUNEL染色细胞凋亡。结果结果表明,miR-34a-5p和MET存在直接靶向作用关系。与Control组相比较,mimic组细胞克隆形成率降低(P0.05),Ki67、PCNA蛋白水平降低(P0.05),细胞凋亡率升高(P0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高(P0.05),侵袭细胞数降低(P0.05)。MET组细胞克隆形成率升高(P0.05),Ki67、PCNA蛋白水平升高(P0.05),细胞凋亡率降低(P0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值降低(P0.05),侵袭细胞数升高(P0.05);与MET组相比较,mimic+MET组细胞克隆形成率降低(P0.05),Ki67、PCNA蛋白水平降低(P0.05),细胞凋亡率升高(P0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高(P0.05),侵袭细胞数降低(P0.05);裸鼠成瘤实验中,与Control组相比较,mimic组第25、30天肿瘤体积降低(P0.05),肿瘤组织重量降低(P0.05),Ki67阳性细胞数降低(P0.05),肿瘤组织细胞凋亡率升高(P0.05)。结论miR-34a-5p过表达靶向MET抑制抑制HepG2增殖、侵袭并促进细胞凋亡,抑制肝癌裸鼠移植瘤肿瘤的生长。