沉默MyD88抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的保护作用

作     者：王成 金卫东 郭长磊 李霞 刘振 韩明磊 侯永兰 崔佳佳 WANG Cheng;JIN Wei-dong;GUO Chang-lei;LI Xia;LIU Zhen;HAN Ming-lei;HOU Yong-lan;CUI Jia-jia

作者机构：新乡市中心医院心血管内一科新乡453000 新乡医学院第一附属医院心血管内科新乡453000 

出 版 物：《现代免疫学》 (Current Immunology)

年 卷 期：2021年第41卷第3期

页      面：204-209页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

基　　金：河南省医学科技攻关计划基金资助项目(201602362) 

主　　题：心肌炎症 肿瘤坏死因子α 髓样分化因子88 核因子κB 

摘      要：为探究沉默髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的影响,采用TNF-α处理心肌细胞,将其随机分为4组:Control组、TNF-α组、TNF-α+shR NA-NC组和TNF-α+sh-MyD88组。Western blotting检测心肌细胞MyD88蛋白表达水平及NF-κB p65磷酸化情况;ELISA检测细胞培养上清液肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase MB,CK-MB)、肌红蛋白(myohemoglobin,Mb)和肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)及IL-1β、iNOS、IL-6、IL-10水平;FACS检测心肌细胞凋亡情况;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)染色检测心肌细胞增殖情况;RT-PCR检测Ki67、Bcl-2、Bax、c-Myc mRNA表达水平。结果表明,与TNF-α+shR NA-NC组比较,TNF-α+sh-MyD88组MyD88蛋白表达水平显著降低(P0.05);CK-MB、Mb和cTnⅠ水平显著降低(均P0.05);心肌细胞凋亡率显著降低(P0.05);BrdU染色阳性细胞数显著增多(P0.05);Ki67、c-Myc mRNA水平和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA比值显著升高(均P0.05);IL-1β、iNOS、IL-6水平显著降低(均P0.05),IL-10水平显著升高(P0.05);p-p65/p65比值显著降低(P0.05)。以上结果说明,沉默MyD88抑制NF-κB p65的活化对TNF-α诱导的心肌细胞损伤具有保护作用。