体外共培养条件下毛囊神经嵴干细胞促进神经束膜细胞迁移和增殖

作     者：于皓杰 杜甑衎 付靖乔 肖楚兰 杨向群 许家军 刘芳 YU Hao-jie;DU Zeng-kan;FU Jing-qiao;XIAO Chu-lan;YANG Xiang-qun;XU Jia-jun;LIU Fang

作者机构：海军军医大学(第二军医大学)基础医学院人体解剖学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院学员四大队上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院学员一大队上海200433 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2021年第42卷第5期

页      面：512-518页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81571211) 

主　　题：神经束膜细胞 毛囊神经嵴干细胞 共培养 细胞增殖 细胞迁移 

摘      要：目的探索体外培养神经束膜细胞的有效方案,并初步研究毛囊神经嵴干细胞(hfNCSC)对神经束膜细胞的激活作用。方法采用“限时消化-差速贴壁-化学药物方法对大鼠坐骨神经束膜细胞进行培养和纯化,同时培养大鼠触须垫hfNCSC,并对细胞进行免疫细胞化学染色鉴定。借助Transwell小室建立hfNCSC与神经束膜细胞的共培养模型,在Transwell上室接种神经束膜细胞,下室接种hfNCSC(hfNCSC共培养组)或不接种细胞(对照组),共培养6、12和18 h后进行结晶紫染色,观测神经束膜细胞的迁移情况。取hfNCSC条件培养基(hfNCSC条件培养基组)和含2%FBS的DMEM培养基(对照组)分别作用于神经束膜细胞,24、48和72 h后用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况。结果本方案可在2周的时间内获得纯度高达(97.66±2.08)%的神经束膜细胞。将神经束膜细胞与hfNCSC共培养6、12和18 h后,可见hfNCSC共培养组神经束膜细胞的迁移数较对照组增多,差异有统计学意义(P0.05);但作用72 h后,hfNCSC条件培养基组神经束膜细胞的细胞活力高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论“限时消化-差速贴壁-化学药物方法可成功培养和纯化神经束膜细胞;hfNCSC可激活神经束膜细胞,促进其迁移和增殖。