利用CRISPR/Cas9基因编辑靶向下调FGFR2缓解Apert综合征小鼠颅缝早闭

作     者：罗凤涛 谢杨丽 李灿 谭乔燕 杜晓兰 陈林 Luo Fengtao;Xie Yangli;Li Can;Tan Qiaoyan;Du Xiaolan;Chen Lin

作者机构：第三军医大学大坪医院战伤组织修复与康复医学研究室重庆400042 第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 

出 版 物：《生物医学转化》 (Biomedical transformation)

年 卷 期：2021年第2卷第2期

页      面：63-71页

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81672125) 重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0112,cstc2018jcyjAX0704) 

主　　题：颅缝早闭 Apert综合征 2型成纤维细胞生长因子受体 CRISPR/Cas9基因编辑 

摘      要：Apert综合征(Apert Syndrome,AS)是一类常染色体显性遗传疾病,主要表现为颅缝早闭、中面部发育不良、并指(趾)、智力发育障碍等,多由FGFR2分子功能增强型点突变引起。目前,此疾病主要靠手术矫形来恢复功能,其中大脑等病变部位手术难度大,难以实施,且通常需要多次手术。CRISPR/Cas9基因编辑技术在人类遗传病治疗中具有巨大潜力。本研究筛选到靶向FGFR2基因的gRNA,与Cas9经慢病毒包装后作用于Apert小鼠(FGFR2^(+/P253R))的原代颅骨细胞、体外培养的颅骨以及活体小鼠颅骨中,可敲低FGFR2的表达,改善Apert原代颅骨细胞的分化程度。CRISPR/Cas9处理体外培养的颅骨及注射至Apert小鼠头颅,颅骨冠状缝早闭状态有效缓解,异常降低的颅骨骨量、骨密度等也显著改善,表明CRISPR/Cas9基因编辑可缓解Apert小鼠头颅异常。本研究为Apert综合征的基因治疗提供了实验依据,有望为其它骨骼遗传病治疗提供新的策略与借鉴。