全沟硬蜱Salp15蛋白家族成员基因的克隆与融合表达

作     者：王欣 孙毅 牛思博 蒋宝贵 WANG Xin;SUN Yi;NIU Si-Bo;JIANG Bao-Gui

作者机构：安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150006 

出 版 物：《寄生虫与医学昆虫学报》 (Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica)

年 卷 期：2013年第20卷第2期

页      面：102-109页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81271878 No.30872196) 

主　　题：涎腺蛋白 全沟硬蜱 宿主免疫 克隆 表达 

摘      要：为明确全沟硬蜱涎腺Salp15蛋白家族的基因表达情况，本文根据已知的Salp15序列设计引物对全沟硬蜱幼蜱的总RNA进行RT—PCR，克隆到可与莱姆病螺旋体外膜蛋白OspC互作的涎腺蛋白Salp15CDS序列，命名为***5。对该蛋白做生物信息学预测，其肽链在N端含有信号肽，在c端含有与CD4分子的结合位点。与其他蜱种Salp15蛋白的相似性分别为：62．3％（北美的肩突硬蜱Ixodesscapularis）、74．5％（欧洲的篦子硬蜱Lricinusiric3）、59．4％（西伯利亚全沟硬蜱Lpersulcatus）、67．6％（日本地区的全沟硬蜱iperl）。将该cDNA序列分别加上EcoRI，SalI酶切位点，插入pMAL．c4X表达载体上，经IPTG诱导。在Transetta（DE3）上融合蛋白成功表达。此工作为研究全沟硬蜱的Salp15与莱姆病螺旋体，以及与宿主动物的相互关系奠定了基础。