一株大鲵虹彩病毒的分离及鉴定

作     者：喻大鹏 程俊 夏洪丽 夏立群 蔡佳 鲁义善 YU Da-peng;Cheng Jun;XIA Hong-li;XIA Li-qun;CAI Jia;LU Yi-shan

作者机构：广东海洋大学深圳研究院深圳518108 广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳518018 武汉临空港经济技术开发区农业发展投资集团有限公司武汉430040 武汉晟丰农业开发有限公司武汉430040 

出 版 物：《淡水渔业》 (Freshwater Fisheries)

年 卷 期：2022年第52卷第4期

页      面：11-17页

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：深圳市科技计划项目(JCYJ20180507183240459) 广西自然科学基金(2020GXNSFAA297243) 南方海洋科学与工程广东省实验室(湛江)(湛江湾实验室)自主立项项目(ZJW-2019-06) 广东海洋大学“冲一流”专项资金项目(231419013) 广西红树林滨海湿地生态保护与可持续利用人才小高地人才资助项目(BGMRC202101) 

主　　题：大鲵(Andrias davidianus) 虹彩病毒科 透射电镜 胖头鲤肌肉细胞系 分离鉴定 

摘      要：2020年5月,广东广州某野生动物保护基地爆发疑似病毒引发的疾病。现场采样发现,病鲵体长约2 m,反应迟钝,体表有出血点或溃疡症状。本研究采用胖头鲤肌肉细胞系(fat head minnow epithelial cells,FHM)培养、超薄切片透射电镜观察、病毒主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)克隆与测序分析等方法,从患病大鲵中分离得到一株病毒,鉴定其属于虹彩病毒科蛙病毒属,命名为大鲵虹彩病毒广州分离株(CGSIV-GZ)。FHM经患病大鲵组织匀浆液接种后出现细胞圆缩、死亡、脱落等典型的细胞病变症状。将感染后的FHM细胞制作超薄切片,通过电镜观察发现,FHM细胞中存在大量直径约100~120 nm具囊膜的正六边形成熟病毒粒子,形态与虹彩病毒相似。根据虹彩病毒MCP基因保守区域序列设计特异性引物对病鲵组织样本进行PCR扩增,获得了431 bp的目的基因片段,测序后经采用BLAST软件分析,发现其与GenBank中的蛙病毒衣壳蛋白基因同源性达96%~99%。确认本次野生动物保护基地大鲵发生大规模死亡是蛙病毒感染所致。