直接PCR方法在捻转血矛线虫耐苯丙咪唑类药物检测中的应用

作     者：昭日格图 侯斌 林鑫 毛冉 哈斯苏荣 Zhaorigetu;HOU Bin;LIN Xin;MAO Ran;Hasisurong

作者机构：赤峰市农牧科学研究所赤峰024031 内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 

出 版 物：《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 (Journal of Inner Mongolia Agricultural University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2022年第43卷第3期

页      面：1-5页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：内蒙古农牧业科学院青年创新基金项目(2018QNJJM09) 

主　　题：捻转血矛线虫 直接PCR耐药性 阿苯达唑 

摘      要：为临床上能快速准确的鉴定捻转血矛线虫对阿苯达唑的耐药性情况,本研究建立了一种快速、灵敏、特异性强、成本低的捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法,合成通用引物后,对PCR退火温度进行筛选、进行特异性、敏感性、重复性试验,建立了捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法。该方法能特异性的扩增出捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白基因中一段385 bp序列,最佳退火温度为60℃,最低检测限度为19 ng。本研究应用建立的Direct-PCR方法和常规PCR方法对32份样品进行Ⅰ型β微管蛋白的提取,结果表明,Direct-PCR扩增阳性率为97%,而常规PCR扩增总阳性率为83%,2种方法差异不显著(P0.05),但扩增阳性率比常规PCR方法效率高,说明该方法更具有推广和应用价值。该试验成功建立了捻转血矛线虫Ⅰ型β微管蛋白Direct-PCR扩增方法,为捻转血矛线虫耐阿苯达唑的快速诊断提供了一种新的方法。