尼帕病毒N基因核酸检测方法对假病毒阳性标准品的制备及鉴定

作     者：黄益曼 宋敬东 韩辉 麻粉莲 郑丽舒 Huang Yiman;Song Jingdong;Han Hui;Ma Fenlian;Zheng Lishu

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京100052 中国海关科学技术研究中心北京100026 

出 版 物：《疾病监测》 (Disease Surveillance)

年 卷 期：2022年第37卷第8期

页      面：1011-1015页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：尼帕病毒N基因 假病毒 阳性标准品 

摘      要：目的 针对致死率极高的尼帕病毒,制备安全、稳定的含有尼帕病毒N基因片段的重组假病毒颗粒阳性标准品。方法 人工合成含有尼帕病毒N基因片段的核苷酸序列并导入CD513B慢病毒载体,与包装质粒同时转染HEK293T细胞,超速离心浓缩纯化,电镜观察假病毒颗粒形态,感染实验验证假病毒功能,并进行线性、稳定性和均一性检测。结果 包装并纯化后的假病毒颗粒浓度较高,直径在100~200 nm,可见明显的G蛋白刺突,感染实验绿色荧光蛋白信号强且不同温度下储存稳定性良好,均一性检测变异系数小于1%。结论 成功构建含有尼帕病毒N基因片段的假病毒颗粒,可作为阳性对照品在尼帕病毒核酸提取和检测过程中实现全程质量控制。