PPARγ及其辅激活子MED1重组腺病毒的制备与生物学功能分析

作     者：白亮 李倩薇 赵四海 贾玉枝 REDDY Janardan K 刘恩岐 BAI Liang;LI Qian-wei;ZHAO Si-hai;JIA Yu-zhi;REDDY Janardan K;LIU En-qi

作者机构：西安交通大学医学部心血管中心动脉粥样硬化与脂代谢研究室陕西西安710061 Department of PathologyFeinberg School of MedicineNorthwestern University 西安交通大学医学部医学实验动物中心陕西西安710061 陕西中医学院陕西咸阳712046 

出 版 物：《西安交通大学学报（医学版）》 (Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2015年第36卷第3期

页      面：294-298页

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(No.81200207) 中央高校基本科研业务费专项资金资助 

主　　题：PPARγ MED1 重组腺病毒 CsCl梯度离心 

摘      要：目的制备大量PPARγ与MED1腺病毒,探讨其生物学功能。方法以实验室现有的腺病毒原液为材料,用HEK293a细胞包装腺病毒,CsCl梯度离心法纯化病毒,A260法测定病毒颗粒,并通过细胞感染、小鼠活体尾静脉注射病毒等实验,用HE染色法、Real-time PCR及免疫组化法进一步鉴定病毒的生物学功能。结果获得Ad/LacZ、Ad/PPARγ和Ad/MED1,其浓度分别为2.51×1012、1.57×1012、2.59×1012 VP/mL。C57BL/6J小鼠经尾静脉注射Ad/PPARγ,小鼠出现脂肪肝,肝细胞聚集大量脂滴,且PPARγmRNA和蛋白表达显著增加。同样,用Ad/MED1感染3T3-L1细胞或给小鼠尾静脉注射Ad/MED1,MED1表达水平都显著升高。结论Ad/PPARγ、Ad/MED1及对照Ad/LacZ成功制备,为体外细胞病毒感染以及活体研究PPARγ与MED1的基因功能以及网络调控奠定了实验基础。