Cfap65基因敲除对小鼠精子发生的影响

作     者：余怡 王家雄 刘彩钊 郑邦旭 王改改 杨慎敏 Yu Yi;Wang Jiaxiong;Liu Caizhao;Zheng Bangxu;Wang Gaigai;Yang Shenmin

作者机构：南京医科大学附属苏州医院生殖与遗传中心苏州215002 宁波市妇女儿童医院生殖医学中心宁波315012 

出 版 物：《中华生殖与避孕杂志》 (Chinese Journal of Reproduction and Contraception)

年 卷 期：2022年第42卷第8期

页      面：829-836页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：中华医学会临床医学研究专项(18010270756) 江苏省卫生健康委资助项目(F201866,H2018050) 浙江省医药卫生科技计划(2019KY622) 姑苏卫生人才项目(GSWS2019053) 

主　　题：精子发生 精子变态 精子鞭毛 Cfap65 

摘      要：目的探讨Cfap65基因敲除对小鼠精子发生的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Cfap65基因敲除小鼠;使用PCR和Sanger测序方法进行小鼠基因型鉴定;依据小鼠基因型将小鼠分为Cfap65-/-组(n=3)与野生型组(n=3);生育力试验评估小鼠生育力;使用HE染色、免疫荧光、透射电子显微镜观察小鼠附睾精子与睾丸精子形态;使用定量实时聚合酶链锁反应检测Cfap65 mRNA在小鼠心、肝、脾、肺、肾和睾丸组织中的表达。结果Cfap65-/-组小鼠表现为完全不育,附睾精子数量减少和活动率低下,形态观察可见精子出现短尾、卷尾和尾部缺失,头部畸形率也显著高于野生型小鼠(1.67%±0.44%比33.00%±1.53%),差异有统计学意义(P0.001)。Cfap65基因敲除导致小鼠精子领结构异常。Cfap65高表达于成年小鼠的睾丸、肺中;Cfap65在小鼠睾丸中的表达从4周龄到6周龄有一个急剧的增加(901.90±33.19比2144.00±22.92),差异有统计学意义(P0.001)。结论Cfap65表达具有组织特异性,缺失后导致雄性小鼠精子发生障碍,这可能与精子领运输障碍有关。