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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:中国医科大学附属第一医院眼科辽宁省沈阳市110001 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁省沈阳市110001 沈阳市皇姑区医院口腔科辽宁省沈阳市110031
出 版 物:《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)
年 卷 期:2004年第8卷第17期
页 面:3319-3321,i005页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学]
主 题:外源过氧化氢酶 基因表达 晶体上皮细胞 抗氧化能力 白内障
摘 要:目的:构建外源过氧化氢酶基因表达载体并使其在晶体上皮细胞中稳定表达,从而提高晶体上皮细胞的抗氧化能力减少白内障的发生。方法:克隆过氧化氢酶基因,测序确定。构建过氧化氢酶基因pIRESneo3表达载体。利用转染的方法将过氧化氢酶基因导入晶体上皮细胞SRA01/04中,筛选稳定表达克隆。以SRA01/04细胞和稳定转染过氧化氢酶基因的SRA01/04细胞为研究对象,使用过氧化氢为处理因素,MTT方法测定过氧化氢对晶体上皮细胞的半数致死量。结果:经上述方法处理后,获得过氧化氢酶高表达晶体上皮细胞SRA01/04-CAT,其过氧化氢酶的表达水平是SRA01/04细胞的3.5倍。过氧化氢对SRA01/04细胞的IC50是32.24μmol/L,对SRA01/04-CAT的IC50是85.32μmol/L,转染过氧化氢酶基因后SRA01/04细胞对过氧化氢的耐受能力提高2.65倍。结论:外源过氧化氢酶基因能够在晶体上皮细胞中稳定表达并使晶体上皮细胞的抗氧化能力提高。