血浆外泌体miR-214-3p作为葡萄膜黑色素瘤诊断及预后评估生物标志物的研究

作     者：周文达 邵蕾 董力 史绪晗 张瑞恒 李赫妍 吴昊天 魏文斌 

作者机构：首都医科大学附属北京同仁医院　北京同仁眼科中心　眼内肿瘤诊治研究北京市重点实验室　北京市眼科学与视觉科学重点实验室　医学人工智能研究与验证工信部重点实验室，北京　100730 

出 版 物：《中华实验眼科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Ophthalmology)

年 卷 期：2022年第40卷第8期

页      面：734-741页

基　　金：国家自然科学基金项目 首都卫生发展科研专项 北京市科委项目 北京市优秀人才项目青年骨干基金项目 首都医科大学附属北京同仁医院青年拔尖人才项目 

主　　题：葡萄膜黑色素瘤 循环微小RNA 生物标志物 外泌体 早期诊断 预后评估 

摘      要：目的:探讨微小RNA(miR)-214-3p在不同类型葡萄膜黑色素瘤(UM)患者血浆外泌体中的差异性表达，评估其是否可作为UM诊疗的新型分子生物标志物。方法:收集2015年12月至2019年10月于北京同仁医院行眼球摘除术并确诊为UM的患者25例，其中原位梭形细胞型UM组和原位类上皮细胞型UM组各10例，转移型UM组5例(包括1例梭形细胞型UM患者和4例类上皮细胞型UM患者);同期收集10例健康对照者作为健康对照组，抽取所有受试者血液样本，提取血浆外泌体，透射电子显微镜下观察外泌体形态，分析外泌体粒径，Western blot法鉴定外泌体标记蛋白，采用实时荧光定量PCR法测定各组患者血浆外泌体miR-214-3p表达水平。采用差异性检验比较UM患者与健康对照者和不同类型UM患者间的血浆外泌体miR-214-3p的差异表达;通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆外泌体miR-214-3p对UM的诊断及分型效能。结果:透射电子显微镜下可见，所提取外泌体呈一侧凹陷的半球形结构，直径约100 nm。囊泡粒径大小为(82.0±2.7)nm。Western blot结果显示外泌体特异性标记蛋白TSG101条带均为阳性，阴性标记蛋白Calnexin均呈阴性。健康对照组、原位UM组和转移型UM组血浆外泌体miR-214-3p相对表达量分别为0.86(0.57，1.49)、0.24(0.10，0.67)和0.43(0.23，0.56)，原位UM组血浆外泌体miR-214-3p相对表达量较健康对照组明显降低，差异有统计学意义( Z＝2.62， P0.05)。 结论:血浆外泌体miR-214-3p在原位UM患者及转移型UM患者中均显著下降，循环miR-214-3p具有作为UM诊断生物标志物的潜力，但血浆外泌体miR-214-3p缺乏对UM分型的评估能力。