单核细胞增多性李斯特菌硫氧还蛋白Lmo1609的应激生物学功能研究

作     者：韩月 陈雨吉 罗平 陈歆丹 曹启予 吴宇康 陈绵绵 翟瑞东 周彬 孙静 管迟瑜 程昌勇 吕晓玲 宋厚辉 HAN Yue;CHEN Yuji;LUO Ping;CHEN Xindan;CAO Qiyu;WU Yukang;CHEN Mianmian;ZHAI Ruidong;ZHOU Bin;SUN Jing;GUAN Chiyu;CHENG Changyong;LV Xiaoling;SONG Houhui

作者机构：浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 宁波检验检疫科学技术研究院宁波海关技术中心浙江宁波315100 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2022年第62卷第9期

页      面：3358-3372页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：宁波市自然科学基金(202003N4179) 国家自然科学基金(31902280,32172849,32002253,32002358,31972648,31872620,31770040) 浙江省自然科学基金(LQ20C180001,LZ19C180001,LQ19C180002) 浙江农林大学学生科研训练项目(2020KX0164,2021KX0121) 

主　　题：单核细胞增多性李斯特菌 硫氧还蛋白 运动性 氧化应激 细菌感染 

摘      要：【目的】本研究旨在构建单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)硫氧还蛋白Lmo1609的基因缺失株,分析Lmo1609的氧化还原酶学活性,及其在细菌生长、运动过程中发挥的作用,并探究了Lmo1609参与细菌抗氧化应激和致病的生物学基础。为阐明其抗应激生物学作用以及完善李斯特菌的感染机制奠定分子基础。【方法】利用同源重组原理构建lmo1609基因缺失株及回补株。通过分子生物学、应激生物学和感染生物学等手段,对Lmo1609的生物学功能进行探索。以胰岛素为底物分析其氧化还原酶学活性;通过构建lmo1609缺失株和回补株,比较野生株和突变株在运动性、生长能力、抗氧化应激、细胞黏附、侵袭和增殖能力等方面的差异,进而鉴定Lmo1609的生物学功能。【结果】缺失lmo1609后,单增李斯特菌在生长能力上无明显变化,而运动能力明显减弱;对H_(2)O_(2)的敏感性增强;对细胞的黏附侵袭能力没有差异;对小鼠的致病力没有显著影响。【结论】本研究首次证实了单增李斯特菌硫氧还蛋白Lmo1609具有还原酶学活性,参与调控细菌的运动和对H_(2)O_(2)的氧化应激耐受,不介导单增李斯特菌的致病性。