抗小鼠 Caspase—12小干扰 RNA 对肝细胞凋亡的抑制作用

作     者：刘海防 谢青 姜山 李光明 周霞秋 史毅 俞红 金由辛 LIU Hai-fang;XIE Qing;JIANG Shan;LI Guang-ming;ZHOU Xia-qiu;SHI Yi;YU Hong;JIN You-xin

作者机构：上海第二医科大学附属瑞金医院感染科200025 上海第二医科大学附属新华医院消化科 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2005年第13卷第12期

页      面：923-926页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30371268)上海市教委曙光计划基金(03SG37) 

主　　题：肝细胞 小鼠 细胞凋亡 Caspase-12 小干扰RNA 

摘      要：目的 观察抗小鼠 Caspase-12小干扰 RNA(siRNA)对小鼠原代肝细胞凋亡的抑制作用。方 法 原位二步灌流法分离并培养 Balb/c 小鼠原代肝细胞，化学合成制备三种抗 Caspase-12不同位点(130， 214，521)的 siRNA，脂质体包裹转染小鼠原代肝细胞。毒胡萝卜素4μmol/L 诱导肝细胞凋亡。逆转录聚 合酶链反应、western blot 检测抑制效果；四甲基偶氮唑盐法检测对细胞凋亡的影响。结果 在浓度为 100 nmol/L 时，siRNA(130)对小鼠原代肝细胞 Caspase-12 mRNA 的抑制率为0，siRNA(214)为52．08%， siRNA(521)为30．73%(t=4．30，P0．05)；在浓度为200 nmol/L 时，三种 siRNA 的抑制率分别为88．07%、 86．22%，89．41%。200 nmol/L 的 siRNA(214)对凋亡细胞 procaspase-12的抑制率为51．43%(t=4．30， P0．01)；MTT 比色实验发现，凋亡细胞活力增高48．76%(t=2．23，P0．01)。结论 抗 Caspase-12 siRNA 对小鼠原代肝细胞凋亡有一定的抑制作用。