下调ClC-5表达抑制多发性骨髓瘤细胞增殖并诱导凋亡

作     者：苗玉迪 胡星星 李艳春 Miao Yudi;Hu Xingxing;Li Yanchun

作者机构：陕西省人民医院血液内科西安710068 西安国际医学中心医院血液病医院实验诊断中心西安710018 

出 版 物：《中国组织化学与细胞化学杂志》 (Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry)

年 卷 期：2022年第31卷第3期

页      面：239-245,266页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：陕西省自然科学基础研究计划(2021JM-548) 

主　　题：多发性骨髓瘤 氯通道5 凋亡 线粒体凋亡通路 

摘      要：目的探讨氯通道5(chloride channel 5,ClC-5)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞凋亡的作用及其机制。方法用免疫荧光和Western blot法检测MM细胞系(ARH77、U266和RPMI8266)和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中ClC-5的表达。ClC-5 siRNA转染MM细胞和PBMC细胞后,CCK-8法检测细胞活性。敲降ARH77和U266细胞中ClC-5后,用Hoechst 33258染色观察细胞核形态,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,JC-1染色检测线粒体膜电位,Western blot检测细胞色素c(cytochrome c,cyt-c)释放和Cleaved Caspase-3表达。结果与PBMC细胞比较,ClC-5在MM细胞中表达升高。敲降ClC-5后,ARH77和U266的细胞活性降低,但PBMC的细胞活性不变。进一步研究显示,敲降ClC-5能导致ARH77和U266的细胞核固缩,凋亡增加,线粒体膜电位降低,促进线粒体cyt-c释放到细胞质,并增加Cleaved Caspase-3表达。结论敲降ClC-5能通过线粒体凋亡通路来促进MM细胞凋亡。