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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:安徽中医药大学研究生院安徽合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院风湿免疫科安徽合肥230031
出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)
年 卷 期:2022年第38卷第7期
页 面:640-645页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学]
基 金:科技部国家重点研发计划中医药现代化研究重点专项(2018YFC1705204) 国家自然科学基金(82074373) 安徽省高校协同创新项目(GXXT-2020-025) 安徽省名中医刘健工作室建设项目(中医药发展秘 11号) 安徽省重点研究与开发计划项目(201904a07020004) 安徽现代中医内科应用基础与开发研究省级实验室(2016080503B041) 安徽省第12批“115”创新团队(皖人才办1号) 新安医学教育部重点实验室项目(No.2020xayx10)
主 题:新风胶囊(XFC) 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) 外周血单个核细胞(PBMC) ENST00000619282 核因子κB(NF-κB)
摘 要:目的 研究长链非编码RNA ENST00000619282(lncRNA ENST00000619282)、 miR-148b-5p、核因子κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)中的表达,以及新风胶囊(XFC)的干预作用。方法 收集正常人和XFC治疗前后RA患者外周血单个核细胞(PBMC)各30例,观察ENST00000619282的表达、与临床指标的相关性分析及XFC的治疗作用;建立RA-FLS永生化细胞系,制备XFC含药血清,观察XFC含药血清对RA-FLS ENST00000619282、 miR-148b-5p及NF-κB通路表达的影响。结果 与正常组相比,RA患者ENST00000619282表达显著升高,受试者工作特征(ROC)曲线结果显示ROC曲线下面积(AUC)为0.7166, Spearman相关性分析结果表明,ENST00000619282与病程、 IgA呈负相关,与28关节疾病活动度评分(DAS28)、视觉模拟评分(VAS)、血沉(ESR)、 C反应蛋白(CRP)呈正相关;XFC治疗后,ENST00000619282表达显著下降。CCK-8法结果显示,TNF-α对RA-FLS最佳处理剂量和时间分别为10 ng/mL和48 h, XFC对RA-FLS的最佳干预浓度和时间分别为648 mg/100 gXFC和72 h。实时定量PCR结果显示,与RA-FLS组相比,TNF-α处理的RA-FLS组ENST00000619282、 B细胞κ多肽基因增强子抑制蛋白激酶γ(IKBKG)、核因子κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、 IKKβ、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、 NF-κB p65的表达显著升高,miR-148b-5p的表达显著降低;经XFC处理后,ENST00000619282、 IKBKG、 IKKα、 IKKβ、 IκBα、 NF-κB p65的表达显著降低,miR-148b-5p的表达显著升高。免疫荧光结果显示,与RA-FLS相比,TNF-α处理的RA-FLS组IKBKG蛋白的表达显著升高;经XFC处理后,IKBKG蛋白的表达显著降低。结论 ENST00000619282在RA-PBMC和RA-FLS中表达均升高,XFC通过下调ENST00000619282和NF-κB的表达、上调miR-148b-5p的表达,抑制RA炎症免疫反应和细胞凋亡。