三氯乙烯致L-02细胞毒性中SET蛋白介导的组蛋白泛素化及类泛素化修饰鉴定

作     者：杨思霞 李深盼 任晓虎 陈效 刘云岗 刘建军 YANG Si-xia;LI Shen-pan;REN Xiao-hu;CHEN Xiao;LIU Yun-gang;LIU Jian-jun

作者机构：南方医科大学公共卫生学院广东广州510515 深圳市疾病预防控制中心深圳市现代毒理学重点实验室深圳市卫生毒理学医学重点学科广东深圳518055 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2022年第36卷第7期

页      面：502-508页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81872666) 广东省自然科学基金(2021A1515011019) 深圳市医学重点学科建设经费资助(SZXK069) 深圳市医疗卫生三名工程项目(SZSM201611090) 

主　　题：三氯乙烯 L-02细胞 肝毒性 SET蛋白 泛素化 类泛素化 

摘      要：目的探讨SET蛋白在三氯乙烯(TCE)致肝细胞毒性中表观遗传效应的作用。方法以TCE8.0 mmol·L^(-1)分别处理L-02细胞和SET稳定低表达的L-02细胞(SET-siRNA细胞)24 h,酸法提取组蛋白后通过乙酸尿素-SDS-PAGE胶双向分离,经胶内酶解后,用液相色谱-电喷雾串联质谱定性和定量分析组蛋白泛素化及类泛素化水平。结果TCE处理的L-02细胞共鉴定出31个组蛋白赖氨酸泛素化修饰位点,32个赖氨酸类泛素化位点,其中15个泛素化位点和17个类泛素化位点与TCE致肝细胞毒性相关。经TCE处理后,L-02细胞有7个位点泛素化水平降低,8个位点泛素化水平升高;14个位点类泛素化水平降低,3个位点类泛素化水平升高。经TCE处理的SET-siRNA细胞中,SET介导了组蛋白H1和组蛋白H2B的10个位点泛素化修饰改变,同时还介导了组蛋白H2B中9个类泛素化修饰位点改变。结论TCE致L-02细胞毒性中,SET介导改变了组蛋白泛素化及类泛素化水平。