边缘革蜱GST序列生物信息学分析及表达鉴定

作     者：郝蕴伟 翟雪洁 李才善 呼尔查 刘凯强 巴音查汗·盖力克 HAO Yun-wei;ZHAI Xue-jie;LI Cai-shan;Huercha;LIU Kai-qiang;GAILIKE Bayinchahan

作者机构：新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第43卷第11期

页      面：46-51页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：新疆维吾尔自治区区域协同创新专项-上海合作组织科技伙伴计划及国际科技合作计划项目(2021E01001) 

主　　题：边缘革蜱 谷胱甘肽硫转移酶(GST) 生物信息学分析 原核表达 

摘      要：为挖掘边缘革蜱谷胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase, GST)家族功能基因,根据边缘革蜱转录组数据信息设计引物,对边缘革蜱6种GST基因进行扩增、克隆、序列测定,测序后进行比对、绘制系统进化树,进行生物信息学分析及抗原性预测;根据系统进化分析,选择4个不同亚型进行原核表达及鉴定。结果显示,经试验筛选了6种边缘革蜱GST功能基因,根据构建出的系统进化树将其命名为DmGSTE2、DmGSTE3、DmGSTK1、DmGSTM5、DmGSTM6和DmGSTZ2,将6种功能基因序列上传至NCBI的GenBank;获得的6种GST均为非过敏原;DmGSTM6有信号肽,存在跨膜区,其他GST皆无信号肽、无跨膜区、无明显疏水区,均为亲水性蛋白;DmGSTM5和DmGSTK1抗原性较强,DmGSTE2抗原性最弱。筛选构建并表达了4种不同亚型的GST,获得了相应重组蛋白。Western blot发现重组蛋白能够与相应蛋白免疫过的阳性鼠血清发生反应,说明具有一定的免疫原性和反应原性。试验结果可为边缘革蜱GST家族抗蜱候选疫苗筛选等深层研究奠定基础。