汉滩病毒S基因的分段表达及其线性和构象型抗原表位分析

作     者：王涛 张全福 李川 刘琴芝 李建东 梁米芳 李德新 WANG Tao;ZHANG Quan-fu;LI Chuan;LIU Qing-zhi;LI Jian-dong;LIANG Mi-fang;LI De-xin

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2005年第21卷第3期

页      面：161-167页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(30371269) 

主　　题：汉滩病毒 核蛋白 抗原表位分析 S基因 基因表达 

摘      要：构建汉滩病毒76-118 N蛋白及其分别从N-端和C-端缺失的共6个突变体,在大肠杆菌BL-21中进行表达,并对其中一些蛋白进行了纯化.通过Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)进行汉滩病毒N蛋白的抗原表位分析,N蛋白及6个缺失突变体都与组特异性抗体L13F3呈阳性反应,而缺失突变体与型特异性抗体AH30呈阴性反应.构建汉滩病毒76-118 N蛋白及其6个缺失突变体的真核表达载体,并在COS7细胞中进行表达.通过间接免疫荧光试验(IFA)进行汉滩病毒N蛋白的抗原表位分析,病人血清与真核表达的N蛋白及6个缺失突变体呈阳性反应.而仅有N蛋白及缺失N端1～30位氨基酸序列的NPN30与型特异性抗体AH30呈阳性反应.证实组特异性抗体L13F3结合的抗原表位位于N端1～30位氨基酸;而C端抗原表位对于型特异性抗体AH30与N蛋白的识别和结合具有重要意义,缺失N端100位氨基酸序列可能破坏羧基端构象型表位,也可以影响N蛋白与AH30的结合.