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速冻水饺细菌总数FISH检测技术的优化

Optimization of FISH to detect the total bacteria in fast-frozen dumplings

作     者:井洪珍 罗剑飞 林炜铁 何庆 

作者机构:华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 

出 版 物:《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期:2013年第39卷第2期

页      面:161-167页

核心收录:

学科分类:0832[工学-食品科学与工程(可授工学、农学学位)] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程] 

基  金:国家自然科学基金(21076090) 

主  题:荧光原位杂交 速冻水饺 优化 细菌总数 

摘      要:探索荧光原位杂交(FISH)技术检测速冻水饺中细菌总数的可行性及特异性,优化样品的快速、准确和便捷的检测体系。采用TAMRA标记的EUB338探针与大肠杆菌进行FISH实验条件的优化,并利用优化的FISH技术对4种速冻水饺中的8个样品进行检测和计数。应用FISH技术检测速冻水饺中细菌总数,理想的样品预处理实验条件为:热固定2 h,4%多聚甲醛固定20 min,系列乙醇脱水5 min,杂交条件为杂交温度为46℃,杂交液中去离子甲酰胺浓度为20%,杂交时间3h,洗脱液中NaCl浓度为225 mmol/L;检测的8个样品中,有2例细菌总数超标。FISH可以特异性的检出速冻水饺中的细菌总数,简便,检测周期短,灵敏度高,为保障食品安全提供更多的理论支持。

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