基于NF-κB通路探讨IRAK3基因表达对脂多糖诱导的心肌细胞损伤的作用及机制

作     者：李伟 王龙涛 陈川斌 林朋 李小蕤 LI Wei;WANG Long-tao;CHEN Chuan-bin;LIN Peng;LI Xiao-rui

作者机构：海南医学院第二附属医院心血管内科海南海口570100 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2022年第22卷第22期

页      面：4242-4246,4278页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：海南省卫生健康行业科研项目(20A200521) 

主　　题：IRAK3 LPS 心肌细胞损伤 NF-κB通路 

摘      要：目的:探讨白介素1受体相关激酶3(IRAK3)基因表达对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的作用及机制。方法:分离培养SD乳鼠原代心肌细胞,随机分为对照组、LPS组、si IRAK3组和si IRAK3+LPS组。si IRAK3组和si IRAK3+LPS组心肌细胞转染IRAK3沉默核糖核酸(si RNA),对照组和LPS组转染阴性对照si RNA。转染48 h后LPS组和si IRAK3+LPS组分别用LPS(10μg/m L)处理心肌细胞6 h,对照组和si IRAK3组加入等量的PBS溶液。采用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测LPS对心肌细胞IRAK3表达的影响,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测四组心肌细胞增殖,采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测四组心肌细胞凋亡。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测四组心肌细胞上清液中炎症因子白介素(IL)-6、肿瘤坏因子(TNF)-α的水平。Western blot检测核转录因子-κB(NF-κB)蛋白和NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)的表达。结果:Western bolt结果显示,LPS使原代心肌细胞IRAK3的蛋白表达升高(P0.05)。与LPS组相比,si IRAK3+LPS组心肌细胞活力升高,心肌细胞凋亡比例降低(P0.05)。与对照组相比,LPS组心肌细胞分泌的IL-6、TNF-α升高,NF-κB蛋白表达升高而IκB-α蛋白表达降低(P0.05)。与LPS组相比,si IRAK3+LPS组心肌细胞炎症因子分泌减少,NF-κB蛋白表达降低,IκB-α蛋白表达升高(P0.05)。结论:干扰IRAK3基因表达通过负向调控NF-κB通路减轻LPS诱导的大鼠原代心肌细胞损伤。