家蚕核型多角体病毒GD株空斑克隆株系的建立

作     者：庞敏 孙翰昌 周泽扬 PANG Min;SUN Han-chang;ZHOU Ze-yang

作者机构：重庆文理学院生命科学与技术学院重庆402168 重庆师范大学生命科学学院重庆400047 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2010年第49卷第4期

页      面：785-787页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 0906[农学-兽医学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：重庆市自然科学基金项目(CSTC-2005BB1138) 

主　　题：家蚕核型多角体病毒 空斑克隆 SNP位点 纯粹性 

摘      要：以家蚕胚胎细胞系(Bm E-SWU1)为病毒培养载体,利用中性红染色的方法对家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)GD株进行了空斑克隆,经扩大培养,获得了GD株空斑克隆株系。根据Bm NPV CQ1株基因组序列的单核苷酸多态性(SNP)分析,选出其中SNP位点较多的gcn 2(General control nonderepressible 2)基因,用于验证BmNPVGD株空斑克隆株系的纯粹性。分别从BmNPVGD株和空斑克隆株的基因组中扩增gcn2基因,经pMD18-T克隆后测序;将两株病毒的gcn2基因分别进行SNP位点分析,发现GD株gcn2基因的潜在SNP位点有2个,而空斑克隆后的病毒株5条gcn2基因序列比较后均未发现多态性位点,说明空斑克隆株经纯化后,病原基因组的纯粹性获得了提高,病原得到了纯化。