连梅芪物汤调控AMPK/TrkA/TRPM7信号通路减轻糖尿病心脏自主神经病变

作     者：孙雪梅 季海刚 高昕 王新东 SUN Xue-mei;JI Hai-gang;GAO Xin;WANG Xin-dong

作者机构：南京中医药大学第三临床医学院江苏南京210028 常州市中医医院江苏常州213004 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2023年第48卷第7期

页      面：1739-1750页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：江苏省中医局科技项目(YB201922) 全国中医药创新骨干人才项目(国家中医药管理局办人教2019-91) 全国名老中医药专家传承工作室建设项目(国中医药人教函75号) 江苏省名老中医专家董其美传承工作室建设项目(苏中医科教10号) 国家自然科学基金项目(82274469) 

主　　题：糖尿病心脏自主神经病变 连梅芪物汤 AMPK TrkA TRPM7 

摘      要：以高脂饮食诱导的糖尿病大鼠模型,探讨连梅芪物汤(Lianmei Qiwu Decoction,LMQWD)改善糖尿病心脏自主神经重构的作用,以腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/肌钙蛋白受体激酶A(tropomyosin receptor kinase A,TrkA)/瞬时性受体电位通道M7(transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)通路为切入点探讨其可能的作用机制。将糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型(model)组、连梅芪物汤(LMQWD)组、AMPK激动剂(AMPK agonist)组、空载TRPM7腺病毒(TRPM7-N)组、过表达TRPM7腺病毒(TRPM7)组、连梅芪物汤+空载TRPM7腺病毒(LMQWD+TRPM7-N)组、连梅芪物汤+过表达TRPM7腺病毒(LMQWD+TRPM7)组、TRPM7通道抑制剂(TRPM7 inhibitor)组。分组给药4周后,行程序电刺激(program electrical stimulation,PES)检测大鼠心律失常易感性;采集大鼠心肌和神经节标本,通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和马松(Masson)染色观察心肌细胞结构和心肌组织纤维化情况;运用免疫组化、免疫荧光、实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)检测心肌组织及神经节组织中TRPM7、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、p-AMPK/AMPK等基因和相关神经标志物的分布与表达。结果显示,LMQWD可显著降低糖尿病大鼠的心律失常易感性,并减轻糖尿病状态下心肌组织的纤维化,降低心肌及神经节中TH、ChAT、GAP-43水平,升高NGF水平,抑制TRPM7表达,并上调p-AMPK/AMPK、p-TrkA/TrkA水平。该研究表明,LMQWD可以减轻糖尿病状态下的心脏自主神经重构,其机制与激活AMPK、进一步磷酸化TrkA而抑制TRPM7表达相关。