蒙古羊双羔性状基因ADAMTS-1作用机制研究

作     者：赵梦瑶 陈晓良 李秀男 苏乐德 田瑛 菅瑞珍 杨燕燕 李海军 ZHAO Mengyao;CHEN Xiaoliang;LI Xiunan;SU Lede;TIAN Ying;JIAN Ruizhen;YANG Yanyan;LI Haijun

作者机构：内蒙古自治区农牧业科学院呼和浩特010031 内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第50卷第8期

页      面：3229-3238页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖] 

基　　金：内蒙古自治区自然基金项目面上项目(2020MS03062) 

主　　题：蒙古羊 ADAMTS-1 双羔性状 卵巢 

摘      要：【目的】以产单、双胎蒙古羊为动物模型初步探究双羔主效基因含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)的作用机制,为蒙古羊高效繁育及其相关研究提供理论依据。【方法】选取具有产单、双胎记录的雌性蒙古羊各12只,采用自然发情方式,通过阴道黏膜涂片和公羊爬跨确定雌性蒙古羊的发情期和间情期,分别取产双羔发情期(DE)、产双羔间情期(DD)、产单羔发情期(SE)、产单羔间情期(SD)蒙古羊卵巢,利用HE染色的方式观察卵巢有腔卵泡形态差异。取蒙古羊卵巢颗粒细胞进行培养,运用免疫荧光技术确定ADAMTS-1表达位置。通过实时荧光定量PCR技术检测ADAMTS-1、孕酮受体(PGR)、丝裂原活蛋白激酶4(MAPK4)、雄激素受体(AR)、丝氨酸蛋白酶抑制剂2(SERPINE2)、多功能蛋白聚糖蛋白聚糖(Versican)在不同组别中的mRNA相对表达水平,并通过Western blotting技术检测ADAMTS-1前体蛋白(pro-ADAMTS-1)和成熟蛋白(MP-ADAMTS-1)在不同组别中的蛋白相对表达水平。【结果】通过HE染色结果可以确定产单、双胎蒙古羊卵巢组织内有腔卵泡形态无表观差异,运用免疫荧光方法检测到ADAMTS-1在蒙古羊卵巢颗粒细胞上表达。通过荧光定量PCR及Western blotting结果可知,DE组蒙古羊中ADAMTS-1在卵巢组织中基因及蛋白表达量显著高于其他3组(P0.05);SE组蒙古羊卵巢组织内AR和PGR基因表达量最高,且显著高于其他3组(P0.05);DD组蒙古羊卵巢组织内Versican、SERPINE2基因表达量最高,且显著高于DE和SD组(P0.05);SE组这两个因子显著高于SD组(P0.05)。【结论】ADAMTS-1于蒙古羊卵巢颗粒细胞中稳定表达,ADAMTS-1对蒙古羊双羔性状的排卵机制具有重要的正向调控作用,而其他多种激素受体以及胞内关键信号基因也与卵巢内卵泡的发育、排出密切相关。