维生素D通过Nrf2/HO-1抑制铁死亡缓解6-羟基多巴胺所致PC12细胞损伤的作用机制研究

作     者：穆清爽 李沛珊 李艳霞 李瑞晟 杨新玲 MU Qingshuang;LI Peishan;LI Yanxia;LI Ruisheng;YANG Xinling

作者机构：新疆医科大学第二附属医院干部一科新疆神经系统疾病研究重点实验室乌鲁木齐830063 新疆医科大学第二附属医院神经内科乌鲁木齐830063 新疆医科大学第二附属医院康复科乌鲁木齐830063 新疆医科大学乌鲁木齐830017 

出 版 物：《新疆医科大学学报》 (Journal of Xinjiang Medical University)

年 卷 期：2023年第46卷第12期

页      面：1580-1588页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金项目(82160232) 中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2022C17) 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室开放课题项目(SKL-HIDCA-2022-NKX8) 

主　　题：帕金森病 铁死亡 维生素D 6-羟基多巴胺 核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1 

摘      要：目的 探讨维生素D(VD)缓解6-羟基多巴胺(6-OHDA)所致PC12细胞损伤的作用与铁死亡及Nrf2/HO-1通路激活的关系。方法 利用6-OHDA构建PC12细胞帕金森病(PD)模型,不同浓度的VD分别联合铁死亡激活剂(Erastin)或Nrf2抑制剂(ML385)干预后,CCK-8法检测PC12细胞活力变化。将PC12细胞分成空白对照组(Control)、6-羟基多巴胺组(6-OHDA)、维生素D组(VD)、铁死亡激活剂组(Erastin)、铁死亡激活剂+维生素D组(Erastin+VD)、Nrf2抑制剂组(ML385)、Nrf2抑制剂+维生素D组(ML385+VD),对应干预结束后,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡水平,检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)含量,铁离子试剂盒检测铁离子含量,qRT-PCR检测谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、铁蛋白重链多肽1(FTH-1)、胱氨酸/谷氨酸反向转运蛋白(XCT,也称SLC7A11)、转铁蛋白受体(TFR-1)表达,Western blot检测Nrf2/HO-1通路激活情况。结果 与Control组比较,6-OHDA、Erastin、ML385均显著抑制PC12细胞活力(P0.01),促进细胞凋亡(P0.01);LDH、MDA水平升高(P0.01), GSH、SOD水平降低(P0.01),铁离子含量升高(P均0.01),GPX4、FTH-1、XCT等的表达降低(P均0.01),TFR-1的表达显著升高(P0.01),Nrf2、HO-1的表达被显著抑制(P0.01);与6-OHDA组比较,VD可显著促进PC12细胞活力(P0.01)、抑制细胞凋亡(P0.01),降低LDH、MDA水平(P均0.01),升高GSH、SOD水平(P均0.01),抑制铁离子沉积(P均0.01),GPX4、FTH-1、XCT等的表达均显著升高(P均0.01),TFR-1的表达显著降低(P0.01),Nrf2、HO-1表达升高(P0.01);ML385可显著抑制VD对上述指标的调控作用。结论 维生素D可激活Nrf2/HO-1通路,缓解6-OHDA所致PC12细胞铁死亡。