口蹄疫病毒P1基因在大肠杆菌中的高效表达及其生物活性的初步分析

作     者：余晓岚 肖少波 方六荣 胡梦雨 严琳 董晓辉 陈焕春 

作者机构：华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2005年第21卷第1期

页      面：163-166页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家 8 63高技术研究和发展计划项目基金资助 (No .2 0 0 1AA2 13 0 5 1)。 

主　　题：口蹄疫病毒(FMDV) P1基因 高效表达 生物活性 分析 

摘      要：将口蹄疫病毒 (FMDV)结构蛋白基因P1的完整cDNA序列插入原核表达性载体pGEX KG中 ,使P1基因与GST融合 ,获得融合表达质粒pKG P1,转化E .coliBL2 1 (DE3) ,经IPTG诱导 ,SDS PADE结果表明GST P1融合蛋白获得高效表达 ,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有免疫学活性 ,表达产物主要存在于细菌裂解液上清中。进一步采用GST纯化试剂盒纯化P1蛋白并作为诊断抗原 ,建立了P1 ELISA诊断方法 ,与FMD间接血凝 (IHA)检测方法平行检测 86 4份血清样品 ,总的符合率达87%。