羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒感染PK-15细胞活性和机制探究

作     者：张诗悦 张亮 张伟 陈九 杨少华 高星熠 闫滨 李宝国 杨宏军 Zhang Shiyue;Zhang Liang;Zhang Wei;Chen Jiu;Yang Shaohua;Gao Xingyi;Yan Bin;Li Baoguo;Yang Hongjun

作者机构：山东中医药大学山东济南250100 山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 农业农村部畜禽生物组学重点实验室山东济南250100 

出 版 物：《山东农业科学》 (Shandong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2024年第56卷第4期

页      面：151-158页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家现代农业产业技术体系项目(CARS36) 山东省重点研发计划(乡村振兴科技创新提振行动计划)项目“预制菜全链条智慧生产技术创新与应用”(2022TZXD0021) 山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2023A21) 

主　　题：羊栖菜多糖 A型塞内卡病毒 提取 纯化 抗病毒 

摘      要：研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖,然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段;通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性,采用水提醇沉法将抗SVA活性最高分子量段的粗多糖进行纯化并测定其细胞毒性及抗SVA活性;通过在SVA感染周期不同阶段给药研究纯化多糖的抗SVA机制。结果表明,分子量越大的粗多糖抗SVA活性越强;多糖浓度和SVA浓度均与抗SVA活性呈现量效关系,纯化后的多糖对SVA(MOI=0.1)感染PK-15细胞的治疗指数为412,1 mg/mL的多糖对SVA(MOI=10-1~104)感染PK-15细胞病毒载量的抑制率在90%~99.999%之间;不同给药时间试验结果表明,多糖能在SVA吸附或穿入细胞以及病毒复制过程发挥抗病毒作用,其中抑制SVA吸附或穿入的活性最强。本研究分离纯化得到的羊栖菜多糖有很强的抗SVA活性,可为后续抗SVA药物的研发提供参考。