股骨头坏死愈胶囊对激素性股骨头坏死大鼠破骨细胞生成的影响

作     者：吴元胜 王春平 朱英杰 刘又文 WU Yuansheng;WANG Chunping;ZHU Yingjie

作者机构：福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建福州350122 河南省洛阳正骨医院/河南省骨科医院河南洛阳471000 

出 版 物：《福建中医药》 (Fujian Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第55卷第5期

页      面：21-25页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河南省中医药科学研究专项课题(20-21ZYZD10) 

主　　题：激素性股骨头坏死 股骨头坏死愈胶囊 破骨细胞 骨吸收 

摘      要：目的 观察股骨头坏死愈胶囊(FHNHC)对激素性股骨头坏死(SANFH)大鼠破骨细胞生成的影响。方法 (1)体外实验:体外分离和培养大鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs),活死细胞荧光染色检测FHNHC提取物对BMDMs活性的影响。将BMDMs分为对照组、FHNHC低剂量组和FHNHC高剂量组,3组均使用含30 ng/mL M-CSF和50 ng/mL RANKL的α-MEM完全培养基向破骨细胞诱导,与此同时FHNHC低剂量组和FHNHC高剂量组分别加入200、400μg/mL FHNHC提取物溶液进行干预。每3 d更换培养基,诱导7 d。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞生成情况;免疫荧光染色检测破骨细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达;Western blot检测组织蛋白酶K(CTSK)、MMP-9、核因子性活化T细胞转录因子1(NFATc1)蛋白表达量。(2)体内实验:将32只8周龄SD大鼠随机分为对照组(n=8)和造模组(n=24),造模组采用注射脂多糖联合甲泼尼松龙琥珀酸钠建立SANFH大鼠模型。采用随机数字表法将造模成功的大鼠分为模型组、低剂量组和高剂量组。低、高剂量组分别按生药量0.4、0.6 g/(kg·d)给予FHNHC提取物药液灌胃,对照组和模型组按4 mL/(kg·d)给予生理盐水灌胃,连续灌胃8周。Micro-CT观察大鼠股骨头结构并分析骨密度(BMD)、骨体积与总积比(BV/TV)、骨小梁厚度(***)和骨小梁分离度(***);HE染色观察大鼠股骨头病理形态学。结果 (1)体外实验:与对照组比较,FHNHC低、高剂量组破骨细胞生成减少,体积变小;MMP-9荧光强度明显减弱(P0.05),CTSK、NFATc1、MMP-9蛋白表达量均明显降低(P0.05)。与FHNHC低剂量组比较,FHNHC高剂量组MMP-9蛋白荧光强度明显减弱(P0.05),CTSK、NFATc1、MMP-9蛋白表达量均明显降低(P0.05)。(2)体内实验:模型组大鼠股骨头骨小梁体断裂稀疏、结构紊乱,出现细胞核固缩,空骨陷窝增加,在骨髓腔内可见大量脂肪颗粒;低、高剂量组大鼠股骨头骨小梁的断裂稀疏情况改善,空骨陷窝以及脂肪颗粒的数量减少,其中高剂量改善更明显。与对照组比较,模型组BMD、BV/TV、***均明显降低(P0.05),***明显升高(P0.05);与模型组比较,低、高剂量组BMD、BV/TV、***均明显升高(P0.05),***明显降低(P0.05);与低剂量组比较,高剂量组BMD、BV/TV、***均明显升高(P0.05),***明显降低(P0.05)。结论 FHNHC能够抑制破骨细胞的生成以及骨吸收功能,改善SANFH大鼠的股骨头结构。