翘嘴鲌Runx2b基因的克隆与表达特征分析

作     者：何昌熙 郑建波 马建波 贾永义 刘士力 蒋文枰 迟美丽 程顺 李飞 HE Changxi;ZHENG Jianbo;MA Jianbo;JIA Yongyi;LIU Shili;JIANG Wenping;CHI Meili;CHENG Shun;LI Fei

作者机构：上海海洋大学水产与生命学院农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 浙江省淡水水产研究所浙江省淡水水产遗传育种重点实验室浙江湖州313001 余姚市水产技术推广中心浙江余姚315400 

出 版 物：《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期：2024年第36卷第5期

页      面：1024-1031页

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：浙江省农业(水产)新品种选育重大科技专项(2021C02069-3) 浙江省自然科学基金(LTGN23C190008) 

主　　题：翘嘴鲌 肌间刺 Runx2b 基因表达 骨化 

摘      要：为探究Runx2b基因在翘嘴鲌肌间刺骨化过程中的调控作用,基于转录组数据和PCR扩增技术克隆获得了翘嘴鲌Runx2b基因全长编码序列。通过茜素红整体骨骼染色对肌间刺(IBs)形成的不同阶段进行了分期,同时采用qRT-PCR技术检测了Runx2b基因的时空表达水平。结果显示,Runx2b基因开放阅读框为1 401 bp,编码466个氨基酸,预测分子量为50.676 ku,理论等电点为9.35;氨基酸序列多重比对显示,翘嘴鲌Runx2b氨基酸序列与近源物种的同源性高达95%以上,且都具有高度保守的Runt和RunxI结构域;系统进化树分析表明,翘嘴鲌与团头鲂的亲缘关系最为接近。茜素红染色结果显示,在肌间刺发育前,翘嘴鲌的主轴骨骼和附肢骨骼已经发育完全;其中,孵化后15 d,尾部肌隔中开始出现小肌间刺;孵化后30 d,翘嘴鲌幼体的肌间刺发育完全。组织表达结果显示,Runx2b基因在翘嘴鲌各组织中均有表达,鳃中的表达量最高,其次是肌肉。此外,Runx2b基因在翘嘴鲌幼体不同生长阶段的表达模式与肌间刺骨化发生的时序保持一致,提示该基因与肌间刺骨化的相关性。研究结果可以为后续无肌间刺翘嘴鲌新种质的创制和肌间刺形成的分子机制提供基础数据。