滇龙胆草中香叶醇10-羟化酶基因的克隆、蛋白结构及表达分析

作     者：王迎夏 赵赛静 田维圣 崔晓雪 黄文倩 屠鹏飞 史社坡 刘晓 WANG Ying-xia;ZHAO Sai-jing;TIAN Wei-sheng;CUI Xiao-xue;HUANG Wen-qian;TU Peng-fei;SHI She-po;LIU Xiao

作者机构：北京中医药大学中药学院中药现代研究中心 北京中医药大学中药学院北京100029 

出 版 物：《天然产物研究与开发》 (Natural Product Research and Development)

年 卷 期：2024年第36卷第9期

页      面：1542-1553页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82173922,81402809) 中央高校基本科研业务费专项(2023-JYB-JBQN-054) 北京市自然科学基金(7192112) 

主　　题：滇龙胆草 龙胆苦苷 生物信息学分析 香叶醇10-羟化酶 基因克隆 

摘      要：本研究基于滇龙胆草转录组数据分析,使用RT-PCR技术克隆获得两条香叶醇10-羟化酶基因,命名为GrG10H1和GrG10H2。使用在线软件对其进行了生物信息学分析,两条基因全长分别为1548 bp、1482 bp。系统进化分析显示该基因与细胞色素P450家族中CYP76B亚家族亲缘关系最近。通过对该蛋白进行三维结构预测、同源模建和分子对接,分析了GrG10H蛋白活性口袋中可能参与催化功能发挥的关键氨基酸残基。荧光定量PCR表明GrG10H1基因在叶中表达水平最高,茎次之,根最低。而GrG10H2基因在根和叶中表达水平较高,在茎中几乎不表达。本研究还建立了能够生产龙胆苦苷的愈伤组织细胞培养体系,为进一步解析龙胆苦苷生物合成机制奠定了基础。