顺铂诱导TNF-α自分泌引发头颈部鳞状癌细胞RIP1/RIP3/MLKL的坏死性凋亡

作     者：汪虹晓 陶德韬 马俊杰 张东林 沈左媛 邓超 周静萍 WANG Hongxiao;TAO Detao;MA Junjie;ZHANG Donglin;SHEN Zuoyuan;DENG Chao;ZHOU Jingping

作者机构：皖南医学院口腔医学院安徽芜湖241002 皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院)口腔颌面外科安徽芜湖241100 安徽省口腔材料与应用转化工程研究中心安徽合肥230031 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2024年第44卷第10期

页      面：1947-1954页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：安徽省高等学校科学研究项目(2024AH040246) 皖南医学院弋矶山医院引进人才基金项目(YR202108) 芜湖市科技计划项目(2022JC30) 安徽省大学生创新创业训练项目计划(S202210368003) 

主　　题：头颈部鳞状癌细胞 顺铂 z-VAD-fmk 坏死性凋亡 Nec-1 

摘      要：目的探讨顺铂是否能够诱导头颈部鳞状癌细胞产生TNF-α,进而激活RIP1/RIP3/MLKL依赖性的坏死性凋亡通路,抑制鳞癌细胞的增殖,并探讨其分子机制。方法选取头颈部鳞状癌细胞系HN4和SCC4作为实验对象,分为对照组、顺铂组、caspases抑制组、坏死性凋亡抑制组。利用CCK-8法检测顺铂刺激后24 h的细胞存活率。随后采用Western blotting检测caspase-8以及坏死性凋亡通路蛋白(RIP1/RIP3/MLKL)和NF-κB(p65)、TNF-α表达情况;结合细胞划痕实验和Western blotting检测上皮间充质转化相关蛋白(N-cadherin、Vimentin、E-cadherin)的表达情况,评估坏死性凋亡对头颈部鳞状癌细胞迁移能力的影响。结果顺铂对HN4、SCC4细胞毒性IC_(50)分别约为10μg/mL、15μg/mL。在顺铂刺激下,与坏死性凋亡抑制剂组相比,caspase-8表达降低(P0.05),N-cadherin、Vimentin表达降低(P0.05)、E-cadherin表达升高(P0.05),坏死性凋亡通路蛋白(RIP1/RIP3/MLKL)表达升高(P0.05),TNF-α和NF-κB(p65)蛋白表达均升高(P0.05)。在顺铂组中,细胞愈合率显著降低于对照组和坏死性凋亡抑制剂组。结论顺铂作用可激活头颈部鳞状癌细胞NF-κB信号通路,并促进TNF-α自分泌,从而引发鳞癌细胞经由RIP1/RIP3/MLKL通路依赖性的坏死性凋亡反应,并抑制肿瘤细胞性增殖。