丙型肝炎病毒体外感染HepG2细胞模型的建立

作     者：徐晓刚 季育华 金根娣 陆志檬 

作者机构：上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 上海第二医科大学附属瑞金医院检验科200025 

出 版 物：《诊断学理论与实践》 (Journal of Diagnostics Concepts & Practice)

年 卷 期：2003年第2卷第1期

页      面：50-52页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：上海市科委重点资助课题(NO984119007)子课题资助 

主　　题：丙型肝炎病毒 体外感染 HepG2 细胞模型 

摘      要：目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型。方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%CO2条件下培养,以后每3～4d传代一次,定期收集培养上清液和细胞。应用RT鄄nested鄄PCR、免疫组化及Westernblot进行病毒核酸和蛋白质的检测。结果:RT鄄nested鄄PCR法检测发现在接种病毒后第4～16天的细胞标本中可检测到HCVRNA正链,接种病毒后第4～24天的细胞标本则可检测到HCVRNA副链。通过免疫组化和Westernblot检测,病毒蛋白(NS3)能在第4天检出。结论:HCV体外感染HepG2细胞模型的建立,可望用于HCV吸附肝细胞机制研究及疫苗中和试验。