KLK4介导氟诱发成釉细胞凋亡的作用机制

作     者：刘晓静 高美丽 阮建平 LIU Xiaojing;GAO Meili;RUAN Jianping

作者机构：榆林市第一医院口腔科陕西榆林719000 西安交通大学生命科学与技术学院生物医学信息工程教育部重点实验室陕西西安710049 陕西省牙颌面疾病临床研究中心西安交通大学口腔医院口腔预防保健科陕西西安710004 

出 版 物：《西安交通大学学报（医学版）》 (Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2024年第45卷第6期

页      面：918-926页

核心收录：

学科分类：1003[医学-口腔医学] 10[医学] 

基　　金：陕西省重点研发计划项目(No.2023-YBSF-659) 榆林市科技计划项目(No.YF-2021-44) 

主　　题：成釉细胞 氟 激肽释放酶4(KLK4) 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨氟对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的氟化钠(NaF)处理ALC细胞24 h、48 h,qRT-PCR和Western blotting检测KLK4 mRNA及蛋白表达;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术、Hoechst 33342染色检测氟对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、真核生物起始因子2a(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)、激活转录因子-4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的蛋白表达。结果1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,与对照组(0 mmol/L NaF)相比,KLK4 mRNA和蛋白表达降低(P0.05)。1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,漂浮细胞增加,其中2.0 mmol/L NaF组细胞相对活力降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。NaF处理细胞24 h后,与对照组相比,0.1、1.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P0.05),2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P0.05);NaF处理细胞48 h后,与对照组相比,2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,G2/M期细胞比例降低(P0.05)。随着NaF处理浓度的升高,亮蓝色的细胞数量逐渐增多,细胞凋亡率也依次升高,除了0.1 mmol/L NaF 24 h处理组外,其余氟浓度处理组细胞凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h后,GRP78和p-eIF2α蛋白表达升高(P0.05)。与对照组相比,1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P0.05),0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞48 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P0.05)。结论NaF可能通过上调GRP78表达,激活eIF2α/ATF4/CHOP信号通路,从而引起KLK4表达抑制,诱发ALC细胞生长异常。