降钙素基因逆转录巢式PCR及其临床应用价值的研究

作     者：秦燕 陆德炎 姚登福 陆建新 丁润生 董志珍 

作者机构：南通医学院附属医院血液研究室南通226001 南通医学院附属医院南通226001 

出 版 物：《南通医学院学报》 (ACTA Academiae Medicinae Nantong)

年 卷 期：1999年第19卷第4期

页      面：392-399页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：降钙素基因 白血病 微小残留病灶 RT-PCR 

摘      要：目的 :建立逆转录巢式 ( RT-nested) PCR方法扩增降钙素 ( CT)基因 ,探讨急性白血病诱导分化前后 CT基因甲基化模式以及在微小残留病灶 ( MRD)诊断中的临床价值。方法提取骨髓单个核细胞 ( BMMC)中的总 RNA,用逆转录酶合成 c DNA,再以巢式 PCR扩增含有 M位点的 CT基因片断 ,并以 Hpa 酶切 PCR扩增终产物 ,分析 CT基因的甲基化模式。结果 :( 1)所建立的 RT-nested PCR法检测 CT基因异常甲基化 ,其灵敏度为 1/ 2 0万 ,比 DNA直接 PCR法高 2 0 0倍 ;( 2 )观察到 CT基因高甲基化状态随着白血病细胞形态和功能上的成熟而部分改变。结论 :灵敏的 RT-nested PCR法分析 CT基因 ,可作为