利用PiggyBac转座子技术构建NLRC5基因过表达BEAS-2B细胞系及其功能研究

作     者：孙丹妮 刘欣悦 饶子凡 杜岚 张湘琳 刘梓谕 侯诗源 沈星 刘蓉蓉 吴兴安 SUN Danni;LIU Xinyue;RAO Zifan;DU Lan;ZHANG Xianglin;LIU Ziyu;HOU Shiyuan;SHEN Xing;LIU Rongrong;WU Xing􀆳an

作者机构：空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员五大队陕西西安710032 

出 版 物：《空军军医大学学报》 (Journal of Air Force Medical University)

年 卷 期：2025年第46卷第4期

页      面：526-532页

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 100102[医学-免疫学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82272330) 陕西省自然科学基金(2024JC-ZDXM-42) 

主　　题：NLRC5 PiggyBac转座子 基因过表达 稳定转染细胞株 

摘      要：目的利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系,为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具。方法根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列,构建目的基因NLRC5的转座子质粒,将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2B细胞。嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化,最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行过表达验证。结果成功构建一株NLRC5过表达的BEAS-2B细胞,且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力。结论通过PiggyBac转座子技术实现了NLRC5的过表达,进而提高了MHC-Ⅰ分子基因的表达。通过对该基因的过表达从而研究NLRC5对MHC-Ⅰ抗原肽提呈途径的调控机制,为理解抗病毒免疫的复杂机制以及开发新的治疗策略提供有力支持。