基于树突细胞外泌体miRNA探究人参皂苷Rg1改善COPD的作用机制

作     者：谢淑敏 郭淑杰 薛丙权 常万顺 陈朝华 彭新 王磊 黄海英 

作者机构：河南中医药大学药学院 河南中医药大学教务处 

出 版 物：《中国医院药学杂志》 (Chinese Journal of Hospital Pharmacy)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河南省省级科技研发计划联合基金项目(222301420090) 国家自然科学青年基金项目(81904021) 2024年度国家实验教学和教学实验室建设研究项目(以“专创融合”为导向的中药学类专业虚实融合实验教学体系的构建) 2019年度河南省高等学校青年骨干教师培养计划项目(2019GGJS109) 河南中医药大学2023年度研究生科研创新类项目(2023KYCX067) 

主　　题：人参皂苷Rg1 慢性阻塞性肺疾病 树突细胞 外泌体 PI3K/AKT信号通路 miR-695 

摘      要：目的：探究人参皂苷Rg1对树突细胞（Dendritic Cells，DCs）外泌体微小RNA（microRNA，miRNA）的影响，分析人参皂苷Rg1改善COPD作用机制。方法：采用体外细胞培养技术诱导DCs，将细胞分为未成熟树突细胞（imDCs）组、人参皂苷Rg1-未成熟树突细胞（Rg1-imDCs）组。使用超速离心法结合超滤法提取各组细胞外泌体并对其表征，Agilent基因芯片技术筛选外泌体差异表达miRNA并进行生物信息学分析，RT-qPCR验证差异表达miRNA，采用PI3K/AKT信号通路进行机制研究。结果：外泌体平均粒径为（127.80±3.16）nm，PDI为0.27±0.01，观察到“茶托样的双层膜结构，阳性表达CD81、Alix和TSG101标志性蛋白；与imDCs组比较，Rg1-imDCs组鉴定出78个差异表达的miRNA，生物信息学分析显示，人参皂苷Rg1主要参与细胞膜、细胞质、细胞核与蛋白结合等功能，影响PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路、Ras信号通路、轴突导向、黏着斑等途径，Rg1-imDCs组上调最显著的是miR-695，其靶基因与PI3K/AKT通路密切相关；RT-qPCR结果验证，与imDCs组比较，Rg1-imDCs组miR-695显著上调（P0.01）；细胞实验表明，imDCs中过表达的miR-695可以显著抑制PI3K和AKT1的蛋白表达（P0.05）。结论：人参皂苷Rg1通过调节imDCs外泌体中的miRNA表达谱影响COPD相关的生物学过程和信号通路，主要通过上调miR-695抑制PI3K/AKT信号通路发挥潜在作用机制。