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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:河南中医药大学药学院 河南中医药大学教务处
出 版 物:《中国医院药学杂志》 (Chinese Journal of Hospital Pharmacy)
年 卷 期:2025年
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
基 金:河南省省级科技研发计划联合基金项目(222301420090) 国家自然科学青年基金项目(81904021) 2024年度国家实验教学和教学实验室建设研究项目(以“专创融合”为导向的中药学类专业虚实融合实验教学体系的构建) 2019年度河南省高等学校青年骨干教师培养计划项目(2019GGJS109) 河南中医药大学2023年度研究生科研创新类项目(2023KYCX067)
主 题:人参皂苷Rg1 慢性阻塞性肺疾病 树突细胞 外泌体 PI3K/AKT信号通路 miR-695
摘 要:目的:探究人参皂苷Rg1对树突细胞(Dendritic Cells,DCs)外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)的影响,分析人参皂苷Rg1改善COPD作用机制。方法:采用体外细胞培养技术诱导DCs,将细胞分为未成熟树突细胞(imDCs)组、人参皂苷Rg1-未成熟树突细胞(Rg1-imDCs)组。使用超速离心法结合超滤法提取各组细胞外泌体并对其表征,Agilent基因芯片技术筛选外泌体差异表达miRNA并进行生物信息学分析,RT-qPCR验证差异表达miRNA,采用PI3K/AKT信号通路进行机制研究。结果:外泌体平均粒径为(127.80±3.16)nm,PDI为0.27±0.01,观察到“茶托样的双层膜结构,阳性表达CD81、Alix和TSG101标志性蛋白;与imDCs组比较,Rg1-imDCs组鉴定出78个差异表达的miRNA,生物信息学分析显示,人参皂苷Rg1主要参与细胞膜、细胞质、细胞核与蛋白结合等功能,影响PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路、Ras信号通路、轴突导向、黏着斑等途径,Rg1-imDCs组上调最显著的是miR-695,其靶基因与PI3K/AKT通路密切相关;RT-qPCR结果验证,与imDCs组比较,Rg1-imDCs组miR-695显著上调(P0.01);细胞实验表明,imDCs中过表达的miR-695可以显著抑制PI3K和AKT1的蛋白表达(P0.05)。结论:人参皂苷Rg1通过调节imDCs外泌体中的miRNA表达谱影响COPD相关的生物学过程和信号通路,主要通过上调miR-695抑制PI3K/AKT信号通路发挥潜在作用机制。