干姜通过TLR4/MAPK信号通路调控Ly6Chi单核/巨噬细胞改善炎症性肠病的作用机制

作     者：李亚兰 张崇豪 刘华琛 苏佳龙 李娜 周梦宇 彭桂英 

作者机构：北京中医药大学生命科学学院 广西医科大学第一附属医院 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2025年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(82204888) 广西壮族自治区科技厅自然科学基金面上项目(2024JJA141469) 北京中医药大学基本科研业务费项目(2019-JYB-TD014,2023-JYB-JBQN-040) 

主　　题：干姜 炎症性肠病 单核/巨噬细胞 Toll样受体4 丝裂原活化蛋白激酶 

摘      要：目的：利用网络药理学技术结合体内外实验验证探究干姜治疗炎症性肠病（IBD）的潜在机制。方法：采用TCMSP、TCMID数据库和CMSP平台获取干姜的活性成分靶点；利用GeneCards数据库获取IBD相关靶点；采用生物学信息注释数据库（DAVID）对核心靶点进行基因本体（GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；借助Cytoscape 3.10.2建立“药物有效成分-疾病靶点-信号通路互作网络。将小鼠随机分为正常组、模型组、干姜组(400 mg·kg-1)。采用葡聚糖硫酸钠（DSS）构建IBD小鼠模型，观察小鼠结肠组织形态学、Ly6C+单核/巨噬细胞、Toll样受体4（TLR4）及炎症因子mRNA的表达。检测干姜水提物对RAW264.7细胞活力的影响；检测100、10、1 mg·L-1干姜对LPS诱导RAW264.7细胞分化为Ly6Chi单核/巨噬细胞、TLR4及炎症因子mRNA水平、TLR4及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路关键蛋白表达情况。结果：筛选获得干姜作用靶点241个、IBD疾病靶点6787个，干姜、溃疡性结肠炎（UC）、克罗恩病（CD）共同靶点122个；获取GO富集297个，KEGG通路富集88条；干姜活性成分作用靶点与IBD靶点基因存在关联。动物实验：与正常组比较，模型组小鼠体质量和疾病活动指数（DAI）评分显著下降（P0.01），结肠长度缩短，结肠上皮损伤和黏膜下层炎细胞浸润明显，病理评分升高（P0.05），Ly6Chi和Ly6Clo单核/巨噬细胞明显增加（P0.05），结肠组织表达TLR4、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平上升（P0.05），Toll样受体4（TLR4）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）、磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）表达增加（P0.05）。经干姜干预后，以上指标逆转，Ly6Chi单核/巨噬细胞的数量明显减少（P0.01）。细胞实验：与空白组比较，LPS组RAW264.7细胞分化为Ly6Chi单核/巨噬细胞的比例和数量明显增加，且其表达TLR4、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平上升（P0.01），TLR4、p-ERK1/2、p-p38 MAPK表达增加（P0.05）。经干姜干预后，Ly6Chi单核/巨噬细胞显著减少（P0.05），炎症因子转录明显降低（P0.05），TLR4/MAPK信号通路被抑制（P0.05）。结论：干姜通过抑制Ly6Chi单核/巨噬细胞中的TLR4/ERK/p38 MAPK信号通路，降低炎症因子水平缓解IBD。